高产3-羟基丁酮枯草芽孢杆菌的选育.pdfVIP

摘要 本文以一株实验室保存的枯草芽孢杆菌YD．1为出发菌株。该菌株的较适碳源 为葡萄糖，较适氮源为玉米浆和酵母粉，发酵过程中需要添加的金属离子为Mn2+， 下摇床发酵3天，3一羟基丁酮产量最高可达15．60∥L。 以YD．1为出发菌株，用紫外线进行诱变，经过初筛和复筛其产量从15．609／L 提高到17．789／L，之后以硫酸二乙酯诱变，经初筛和复筛获得目的菌株S．10，产量 19．029／L，较出发菌株提高21．92％。 对诱变菌株S．10进行遗传稳定性实验，将S．10在斜面上连续传代20次，分别 取第l、5、10、15、20代进行发酵，测定其3．羟基丁酮产量，结果证明该菌株遗传 稳定性良好，具备作为生产菌株的潜力。 对菌株S．10的生理生化特征进行初步研究。与出发菌株YD．1相比，诱变菌株 S．10死灭温度提高l℃，发酵液的颜色发生一定变化，培养14h的诱变菌株在显微 镜下观察时发现更容易串联生长，其他生理生化指标无明显变化。 实验确定发酵液的最佳碳源为葡萄糖，最佳氮源为酵母粉与玉米浆的混合物。 研究了二价金属离子M92+、Zn2+、Mn2+与三价金属离子Fe对发酵产物的作用，四 种离子均有促进作用，其中，Mn2+促进作用最为明显，其他离子作用相对较小。优 化后，3．羟基丁酮产量提高到19．88∥L。