实时荧光定量PCR技术原理.pdf

实时实时荧光定量荧光定量PCR技术原理技术原理 实时实时荧光定量荧光定量 技术原理技术原理 王秋泉王秋泉 王秋泉王秋泉 Field Application Scientist Tel: 800 820 8982 / 400 820 8982 什么是实时荧光定量什么是实时荧光定量什么是实时荧光定量什么是实时荧光定量PCR?PCR? 什么是实时荧光定量什么是实时荧光定量什么是实时荧光定量什么是实时荧光定量 •一种实时监控核酸扩增的技术 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化对PCR过程进行 实时监控，以此实现对初始模板的定量分析。 2 Life Technologies 定量定量定量定量PCRPCR如何工作如何工作如何工作如何工作?? 定量定量定量定量 如何工作如何工作如何工作如何工作 • PCR反应液加入了 各种类型的荧光标记物 一个PCRPCR循环 3 Life Technologies 定量定量定量定量PCRPCR如何工作如何工作如何工作如何工作?? 定量定量定量定量 如何工作如何工作如何工作如何工作 • 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强 PCR PCR PCR 产物 大量大量PCR产产物物 大量大量 产产物物 4 Life Technologies 定量定量定量定量PCRPCR如何工作如何工作如何工作如何工作?? 定量定量定量定量 如何工作如何工作如何工作如何工作 • 无论是哪个型号,所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分 2. 光源 3. 检测器 1. 热循环模块 5 Life Technologies 定量定量定量定量PCRPCR如何工作如何工作如何工作如何工作?? 定量定量定量定量 如何工作如何工作如何工作如何工作 • 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加 循循环环1 循循环环 滤滤光片光片A 滤滤光片光片 样样品品1 样样品品 Level: 6 Life Technologies 定量定量定量定量PCRPCR