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星形胶质细胞基因表达谱差异及其对损伤反应的研究 中文摘要 中 文摘要 星形胶质细胞是中枢神经系统中一种主要的胶质细胞类型。它们对于维持神经元 周围的环境至关重要，星形胶质细胞行为的异常改变可以引起神经元的功能障碍。新 近研究表明：星形胶质细胞不仅具有营养和保护神经元的作用，而且参与神经系统的 高级功能活动。 星形胶质细胞发生分化的“双谱系学说(T1A谱系和O-2A谱系)”将星形胶质 细胞分为1型星形胶质细胞(type-1 astrocyte，T2A)。两型星形胶质细胞分别由两种不同抗原表达的祖细胞发育分化而来： 胞(oligodendrocyte—type2删locytc cells)。研究表明，T1A和T2A在发生 progenitor 时间、细胞形态及功能等方面均存在差异。我们实验室的研究发现，T1A和T2A在分 化过程中，细胞骨架蛋白vimemin和钙结合蛋白S-1008的抗原表达存在差异。 目的 探讨稳定的分离纯化O-2A谱系细胞的方法，以获得纯化的T2A培养；比 较T1A和T2A发生及分化过程中基因表达谱差异；研究不同型别星形胶质细胞损伤 后的反应差异。 方法根据T1A、O．2A谱系细胞的发生分化时间和生长速率的差异及细胞粘附 特性的不同，采用振荡法和差速消化法，并结合使用富含血清的培养基，分离纯化T2A： 应用基因芯片技术比较纯化培养的TlA和T2A基因表达谱差异；在无血清培养中， 建立混合胶质细胞机械损伤模型，观察TlA和T2A在损伤后的不同反应。 结果(1)分化成熟的T2A，胞体较大，折光性弱，胞核偏向一侧，可见一个核 仁，从胞体上伸出许多细长的突起，由突起上再发出更为细小的分支，GFAP和A285 免疫标记，胞体和突起均呈阳性反应；(2)基因芯片结果显示，267条基因在T1A和 星形胶质细胞基因表达谱差异及其对损伤反应的研究 中文摘要 械损伤后，底层的T1A胞体延长，向损伤区域伸出“伪足样”突起，胞体不发生迁移， 而上层的O．2A祖细胞向损伤区域迁移，并发生分化改变，形成T2A。 结论(1)采用振荡法和差速消化法，并结合使用富含血清的培养基，建立了分 离纯化T2A的方法；(2)T1A和T2A的基因表达存在差异，提示两型星形胶质细胞具 有某些不同的生物学功能；(3)T1A和T2A以不同的方式参与损伤后反应，提示两者 在损伤后的胶质修复中发挥不同的作用。 关键词星形胶质细胞，细胞谱系，基因表达谱，分化，差异 作 者：万明辉 指导教师：夏春林教授 II 星形胶质细胞基因表达谱差异及其对损伤反应的研究 英文摘要 on Gene Profileof Study ExpressionAstrocytes andTheir Reactionsto Injury ABSTRACT areoileofthe cell foundinthecentralnervo?／s Astrocytes majortypes system(CNS)． are for theenvironmentaroundneuronsandabnormal important They maintaining in behaviourcause forneur