色谱理论知识.ppt

氮 磷 检 测 器（NPD） 放大器 + - 色谱柱 空气 尾吹气 氢气 a、低浓度的氢在热电离源表面附近形成一层化学活性很高的“冷氢焰区”； b、当氮磷化合物进入冷氢焰区时，即发生热化学分解，产生CN和PO、 PO2等电负性基团 c、CN和PO、PO2等电负性基团从电离源表面或其周围的气相中得到电子，变成负离子； d、负离子在高压电场中向正电位的收集极移动，形成微电流，产生信号。 NPD：热电离形成负离子、有选择性、灵敏度高 FID：热电离形成正离子、无选择性、灵敏度低 NPD是目前除了MSD之外灵敏度最高的检测器。 电 子 捕 获 检 测 器（ECD） 放 大 器 色谱柱 尾吹气 放射源 收集极（阳极） 阴极 a、载气及尾吹气进入ECD池，在放射源发出的β射线的轰击下被电离， 产生大量电子； b、在由阴极和阳极形成的电场作用下，电子 流向阳极，形成10-8~10-9A的基流； c、当电负性物质进入ECD池时，即俘获池内 部分电子； d、部分电子被俘获后，流向阳极的电子流减 弱，基流下降产生电信号。 ECD是一种高选择性检测器，仅对含有卤素、磷、硫、氧等元素的化合物有很高的灵敏度，检测下限10-14 g /mL，对大多数烃类没有响应。 火 焰 光 度 检 测 器（FPD） a、色谱流出物、尾吹气和空气混合后从中心孔喷出，过量氢从四周环形孔中喷 出，点燃后形成较大的扩散富氢火焰； b、各分离组分在火焰中分解并发出特征光 (烃类主要在火焰底部的富氧焰中发光，硫 、磷在火焰上部的扩散富氢焰中发光)； c、透过石英管和蓝宝石窗的特征光经过滤 光片过滤，仅硫(394nm)或磷(526nm)的特 征光到达光电倍增管形成微电子流，经放大 产生电信号。 载气 空气 氢气 燃烧室 石英管 蓝宝石窗 滤光片 放大器 高压电源 光电倍增管 FPD为选择性检测器，测硫时需安装 硫滤光片，测磷时需安装磷滤光片。 高 效 液 相 色 谱 液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法。 高效液相色谱法是在经典液相色谱法的基础上，引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。其特点在于色谱柱是以特殊的方法用均匀、小粒径的填料填充而成，流动相改为高压输送，同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。 液相色谱的发展 高效液相色谱的结构 高效液相色谱仪主要有输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。 负责流动相的贮存和供给，其组成包括：流动相贮存容器、高压泵，还包括在线脱气系统、流动相比例调节阀、在线混合器等。 输液系统 流量控制稳定、精准，并有较大的调节范围； 有较高的输液压力，且压力平稳，无脉冲（或脉冲小）， 能抗溶剂腐蚀； 对输液泵的要求： 高 压 泵 恒压泵 恒流泵 螺旋注射泵 柱塞往复泵 隔膜往复泵 梯度洗脱 高压梯度: 利用两台高压输液泵，将两种不同的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。 低压梯度: 一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。 梯度洗脱是在一个分析周期内程序控制流动相的组成，如溶剂的极性、离子强度和pH值等，用于分析组分数目多、性质差异较大的复杂样品。采用梯度洗脱可以缩短分析时间，提高分离度，改善峰形，提高检测灵敏度。 进样系统 目前大都使用手动六通进样阀或自动进样器。 进样装置要求：密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。 该系统包括预柱、主色谱柱、柱后衍生柱、柱温箱等。 分离系统 在HPLC系统中，不能保证所注射样品能够完全洗脱，每次进样总会有一部分残留在柱头，久之就会使柱头失效。 预柱是一小段与柱填料相同的保护柱，位于进样阀和主色谱柱之间， 起到延长色谱柱的寿命，保证重现性结果。 由于色谱柱恒温箱可以精确、稳定的控制色谱柱的使用温度，对于提高色谱柱的柱效，改善色谱峰的分离度，缩短保留时间，降低反压，保证分析样品结果的重复性，具有不可忽视的作用。使其成为高效液相色谱仪的重要配套装置。 液固色谱法 液液色谱法 离子交换色谱法 离子对色谱法 排阻色谱法 亲和色谱法 液 相 色 谱 液固色谱法 固定相为固体吸附剂，根据混合物中的各组分在固定相上吸附能力的差异而进行分离。分离过程是一个吸附－解吸附的平衡过程。适用于分离分子量2