02 基因工程 02解读.ppt

外源DNA转化法 接合转化法 是通过供体细胞同受体细胞间的直接接触而传递 外源DNA的方法。该转化系统一般需要三种不同类型 的质粒，即接合质粒、辅助质粒和运载质粒(载体)。 三种质粒共同存在于同一宿主细胞，与受体细胞 混合，通过宿主细胞与受体细胞的直接接触，使运载 质粒进入受体细胞，并在其中能稳定维持。 外源DNA转化法 电穿孔转化法 利用高压电脉冲作用，使 细胞膜上产生可逆的瞬间通道， 从而促进外源DNA的有效导人。 电穿孔转化法的效率受电场强 度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。此方法主要用于微生物细胞和动植物悬浮细胞或原生质体的基因转化。 外源DNA转化法 微弹轰击转化法 又称基因枪转化法，以 高压气体为动力，利用高速 运行的金属颗粒轰击细胞， 将包裹在金属颗粒表面的外 源DNA分子随金属颗粒送入 细胞的转化方法。该法简单 快速，可直接处理植物组织，接触面积大、转化率高。 外源DNA转化法 激光微束穿孔转化法 利用直径很小、能量很高的激光微束照射受体细 胞，可导致细胞膜的可逆性穿孔。根据这一原理，在 荧光显微镜下找出合适的细胞，然后用激光光源替代 荧光光源进行照射，导致细胞膜穿孔，处于细胞周围 的外源DNA分子随之进入细胞。 外源DNA转化法 超声波处理转化法