红豆杉属植物代谢分析及其代谢网络的构建课件.ppt

红豆杉属植物代谢分析及其代谢网络的构建 汇 报 内 容 红豆杉属植物次级代谢产物的多样性 紫杉醇生物合成路径研究进展 HPLC fingerprinting of Taxus extract Chemical markers for Taxus LC-MS profiling of Taxus?chinensis?var.mairei 建立了红豆杉属植物提取物（枝叶和根须）的指纹分析方法，首次基于代谢指纹图谱完成了该属植物的化学分类及化学标志物的找寻 进行了红豆杉属植物粗提物的LC-MS分析，完成了红豆杉属植物根须及南方和中华红豆杉属植物枝叶成分的鉴定 初步完成了红豆杉属植物根须及南方红豆杉枝叶中部分代谢网络的构建 完成曼地亚，东北，欧洲等红豆杉植物枝叶成分鉴定工作 完成不同种属植物枝叶紫杉烷合成相关代谢网络构建工作，比较其之间的差异，推测相应的代谢酶 采用代谢控制分析，基元通量模式等方法分析构建的代谢网络，找出网络调控的关键节点，为代谢工程优化提出依据 致谢 感谢973计划资助(2007CB707802)； 感谢以下企业和单位的合作与支持： 加拿大Montreal植物园（Stephane Bailleul博士）； 昆明植物所（邱明华教授）； 西藏察隅林业局； 湖北房县红豆杉种植基地； 福建杉杉药业； 福建南方生物技术公司； 浙江丽水红豆杉种植园； 四川富马红豆杉种植园。 感谢上海中医药大学王峥涛教授及其研究组的技术支持； 感谢1804组在样品测试上的帮助； 感谢杨凌研究员及1806组全体成员给予的建议和帮助； * * * 中国科学院大连化学物理研究所 Dalian Institute of Chemical Physics，Chinese Academy of Sciences 中国科学院大连化学物理研究所药用资源开发研究组 20th. Sept. 2007 张延延 葛广波 导师：杨　凌　研究员 研究背景 工作进展 红豆杉属植物枝叶HPLC指纹分析及化学分类学研究； 红豆杉属植物次级代谢产物的鉴定； 红豆杉属植物代谢网络的构建 结论与展望 研 究 背 景 紫杉烷为一类三环二萜类化合物（1-2）； 红豆杉属植物特征的次级代谢产物； 从自然界中已发现近400个紫杉烷类化合物。 Paclitaxel (TaxolTM) 10-Deacetyl-BaccatinⅢ（10-DAB） 天然红豆杉资源 直接提取 提取10-DAB 化学半合成 化学全合成 植物/微生物细胞培养 利用植物生产紫杉醇/有用紫杉烷 必须对其生物合成途径的关键步骤及其调控机制有深刻的理解 The systematics and distribution of the genus Taxus a. the Krüssmann classification. 红豆杉属植物简介 红豆杉属植物是一类古老的植物类群，全世界有 10 种，分布于北半球的温带至热带地区。中国有 4 种 1 变种。 蛋白表达 mRNA表达 代谢流量 （化合物种类及产物量） T. mairei 1 2 3 5 4 6 1 4 5 6 T. media 10-Deacetyl baccatin Ⅲ ； 10-deacetyl-7-xylosyl taxol ; Taxinine M； 10-Deacetyl taxol; Cephalomannine； Taxol 0 植物生长环境 (地理因素，组织部位) 红豆杉属植物基因型 X mRNA表达水平 蛋白表达水平 代谢物流量 (代谢物类型及含量) 化合物表现型 植物生物 合成路径相关酶 代谢通路及 生物合成途径 含量低于0.1‰ 生物合成前体 存在的问题 没有考虑不同红豆杉属植物生物合成的差异 没有考虑植物不同生长部位生物合成的差异 单纯以紫杉醇为目标来研究相关合成路径，没有系统研究各种紫杉烷的合成对代谢网络的影响 研 究 框 架 参与 代谢酶 酶-产物 相关性 参与 化合物 枝叶 树根 不同种属红豆杉资源 代谢物指纹图谱 HPLC/UPLC分析分离 红豆杉属植物化学分类 LC/MS鉴定代谢产物 构建代谢网络化学成分 紫杉烷生物合成相关酶 酶活性 酶调控机制 与代谢物相关性 构建多条紫杉烷合成路径 构建红豆杉植物代谢网络 基元通量模式 代谢控制分析 代谢流分析 通量平衡分析 代谢网络关键节点 代谢工程优化和改造 T. maire