维生素xin课件.ppt

（三）物理化学方法测定维生素 1分光光度法 1.1三氯化锑光度法测维生素A的含量 原理 在氯仿溶液中，维生素A与三氯化锑作用可生成蓝色可溶性络合物，在620nm波长处有最大吸收峰，其蓝色的深浅与维生素A的含量在一定的范围内成正比，故可通过吸光度测定维生素A的含量。 适用范围及特点 本法适用于维生素A含量较高的各种样品(高于 5—10μg/g )，对低含量样品，因受其他脂溶性物质的干扰．不易比色测定： 该法的主要缺点是生成的蓝色络合物的稳定性差。比色测定必须在 ，否则蓝色会迅速消退，将造成极大误差。 6秒钟内完成 注意： 1. 维生素A见光易分解，整个实验应在暗处进行，防止阳光照射，或采用棕色玻璃避光。 2. 三氯化锑腐蚀性强，不能沾在手上，三氯化锑遇水生成白色沉淀．因此用过的仪器要先用稀盐酸浸泡后再清洗。 1. 2三氯化锑光度法测维生素D的含量 原理 在氯仿溶液中，维生素D与三氯化锑结合生成一种橙黄色化合物，并于500nm波长处有一个最大的吸收，其呈色强度与维生素D的含量成正比。 * * * 植胚乳杆菌(Lactobacillus plantarum) 作为受试微生物。菌粉在样品分析使用前，必须先接种在乳杆菌的琼脂培养基上，37℃培养24h进行活化，如菌生长率较低，可进行第二次转接。生长率一般由浊度法测定，如果以乳杆菌作为受试体，也可采用酸度法测定。如在接种培养前不能得到澄清的样品，就有必要采用后面一种方法。在选择这两种方法时，必须考虑到在酸度测定法中，受试体的培养时间需要延长至72h。 * * * * 通常先用皂化法处理样品，水洗去除类脂物。然后用有机溶剂提取脂溶性维生素(不皂化物)，浓缩后溶于适当的溶剂后测定。在皂化和浓缩时，为防止维生素的氧化分解，常加入抗氧化剂(如焦性没食子酸、维生素C等)。对于某些液体样品或脂肪含量低的样品，可以先用有机溶剂抽出脂类，然后再进行皂化处理；对于维生素A、D、E共存的样品，或杂质含量高的样品，在皂化提取后，还需进行层析分离。注意分析操作—般要在避光条件下进行。 * （五）物理化学方法 维生素A的测定 维生素A是由β—紫罗酮环与不饱和一元醇所组成的一类化合物及其衍生物的总称，包括A1和A2。维生素Al即视黄醇。维生素A2即A3—脱氢视黄醇，是视黄醇(维生素A1)衍生物之一。维生素Al还有许多种衍生物。 维生素A存在于动物性脂肪中，主要来源于肝脏、鱼肝油、蛋类、乳类等动物性食品中。植物性食品中不含维生素A，但在深色果蔬中含有胡萝卜素，它在人体内可转变为维生素A，故称为维生素A源。 * 2. 维生素D的测定 维生素D是指含有抗佝偻病活性的一类物质，具有维生素D活性的化合物约有10种，其中最重要的是维生素D2、维生素D3。维生素D2天然不存在，维生素D3只存在于某些动物性食物中。但它们都可由维生素D原(麦角固醇和7—脱氢胆固醇)经紫外线照射形成。 维生素D的含量一般用国际单位(1U)表示，1国际单位的维生素D相当于0.025ug的维生素D。几种富含维生素D的食品中维生素D的含量(1U/100g)如下：奶油50，蛋黄150～400，鱼40～150，肝10～70，鱼肝油800～30000，强化麦乳精及强化奶粉400。 维生素D的测定方法有：比色法、紫外分光光度法、气相色谱法、液相色谱法及薄层层析法等。其中比色法灵敏度较高，适用于维生素D含量较高的食品的测定，但操作十分复杂、费时。气相色谱法虽然操作简单，精密度也高，但灵敏度低，不能用于含微量维生素D的样品。液相色谱法的灵敏度比比色法高20倍以上，且操作简便，精度高，分析速度快，是目前分析维生素D的最好方法。 3. 维生素E的测定 维生素E又称生育酚，属于酚类化合物。它们分成二类：生育酚与三烯生育酚。它们都是苯并二氢吡喃的衍生物。维生素E广泛分布于动、植物食品中，含量较多的为麦胚油、棉子油、玉米油、花生油、大豆油等植物油料，此外肉、鱼、禽、蛋、乳、豆类、水果以及绿色蔬菜中也都含有维生素E。 食品中维生素E的测定方法有比色法、荧光法、气相色谱法和液相色谱法。比色法操作简单，灵敏度较高，但对维生素E没有特异的反应，需要采取一些方法消除干扰。荧光法特异性强、干扰少、灵敏、快速、简便。高效液相色谱法具有简便、分辨率高等优点，可在短时间完成同系物的分离定量，是目前测定维生素E最好的分析方法。 * 2. 维生素B2的测定 维生素B2即核黄素。在食品中以游离形式或磷酸酯等结合形式存在。膳食中的主要来源是各种动物性食品，其中