酶的非水相催化课件.pptVIP

Chapter 7 Enzymatic catalysis in Non-aqueous system 酶的非水相催化 Contents of chapter 7 7.1 酶催化反应的介质 酶非水相催化的几种类型 离子液介质中的酶催化 酶在离子液中进行的催化作用。离子液（ionic liquids）是由有机阳离子与有机（无机）阴离子构成的在室温条件下呈液态的低熔点盐类，挥发性低、稳定性好。 酶在离子液中的催化作用具有良好的稳定性和区域选择性、立体选择性、键选择性等显著特点。 无溶剂或少溶剂反应系统 反应系统不用溶剂或用少量的溶剂。 7.2 有机介质反应体系 ⑴ 单相共溶剂体系（水/水溶性有机溶剂） ⑵ 两相体系（水/水不溶性有机溶剂） ⑶（正）胶束体系 ⑷ 反胶束体系 ⑸ 微水介质体系（有机溶剂体系）☆ ⑴与水溶性有机溶剂组成的均一体系 这种均一体系是由水和极性较大的有机溶剂互相混溶组成的反应体系。（亲脂性底物） 酶和底物都是以溶解状态存在于均一体系中。不存在传质阻碍，但由于极性大的有机溶剂对一般酶的催化活性影响较大，所以能在该反应体系的进行催化反应的酶较少。 ⑵两相体系 这种体系是由水和疏水性较强的有机溶剂组成的两相或多相反应体系。游离酶、亲水性底物或产物溶解于水相，疏水性底物或产物溶解于有机溶剂相。 催化反应通常在两相的界面进行。一般适用于底物和产物两者或其中一种是属于疏水化合物的催化反应。 如果采用固定化酶，则以悬浮形式存在两相的界面。 Aquous Two Phase System—ATPS 构建两相体系实现在线产物分离 两相体系将头孢立新得率提高3倍 ⑶（正）胶束体系 胶束又称为正胶束或正胶团，是在大量水溶液中含有少量与水不相混溶的有机溶剂，加入表面活性剂后形成的水包油的微小液滴。 表面活性剂的极性端朝外，非极性端朝内，有机溶剂包在液滴内部。 反应时，酶在胶束外面的水溶液中，疏水性的底物或产物在胶束内部。反应在胶束的两相界面中进行。 ⑷反胶束体系 含有表面活性剂与少量水的有机溶剂系统。 反向微团：疏水尾部向外，与非极性的有机溶剂接触；极性头部向内，形成一个极性核。 反应时，酶分子在反胶束内部的水溶液中，疏水性底物或产物在反胶束外部，催化反应在两相的界面中进行。 ⑸微水介质体系 微水介质体系(microaqueous media)是由有机溶剂和微量的水组成的反应体系，是在有机介质酶催化中广泛应用的一种反应体系。 通常所说的有机介质反应体系主要是指微水介质体系。 微量的水主要是酶分子的结合水，它对维持酶分子的空间构象和催化活性至关重要。另外有一部分水分配在有机溶剂中。 ◆有机介质酶催化的优点 1.有利于疏水性底物的反应。 2.能催化在水中不能进行的反应。 3.可改变反应平衡移动方向。 4.可控制底物专一性。 5.可防止由水引起的副反应。 6.酶易于实现固定化。 7.酶和产物易于回收。 8.可提高酶的热稳定性，可避免微生物污染。 7.3 酶在有机介质中的催化特性 酶在有机介质中起催化作用时，由于有机溶剂的极性与水有很大差别，对酶的表面结构、活性中心的结合部位和底物性质都会产生一定的影响，从而显示出与水相介质中不同的催化特性。 底物特异性 立体选择性 区域选择性 健选择性 热稳定性 活性 pH值 ⑴ 底物专一性： 在有机介质中，由于酶分子活性中心的结合部位与底物之间的结合状态发生某些变化，致使酶的底物特异性会发生改变。 有机介质使某些酶的专一性发生变化，是酶活性中心构象刚性增强的结果。 酶促反应底物专一性的本质是由于酶能够利用它与底物结合能和酶与水分子之间的结合能的差值。 从酶和底物间或键间的自由能的利用来分析：在水溶液中，酶活性中心的极性基团和极性强的底物分子之间形成强的氢键，需要更多的能量来破坏它们之间的氢键，以利于酶—底物络合物的形成，导致相应反应速度降低（即酶与底物复合物的结合能高，故在水溶液中倾向于选择极性低的底物）；而在有机相中，因其不能形成氢键，酶对底物的选择性朝相反的方向进行（倾向于选择极性强的底物）。 酶和底物之间的结合能是酶催化反应的主要推动力，底物必须从反应介质中解析出来与酶活性中心结合。很多酶的活性中心都是疏水性的，它们与疏水底物反应最有利，因为疏水性底物更容易从水中解析到达疏水性活性中心。然而以有机溶剂替代水后，疏水性底物与有机溶剂间的相互作用增强，底物从溶剂到达活性中心就比在水中困难，从而减慢了酶催化反应的速度。而亲水性底物在疏水性较强的溶剂中则容易进入酶的活性中心，从而加快酶催化反应速度。 ⑵ 立体选择性： 酶的对映体选择性(enantioselectivity)又称为立体选择性或立体异构专一性，是酶在对称