DNA复制与修复概述.pptVIP

一、概念 逆转录指遗传信息从RNA流向DNA， 是RNA指导下的DNA合成过程，即以RNA为 模板，四种dNTP为原料，合成与RNA互补的 DNA单链。 逆转录酶 二、逆转录酶(reverse transcriptase) 催化逆转录过程的酶称逆转录酶，RNA 病毒中都含有此酶。 具有三种酶活性： RNA指导的DNA聚合酶 RNA酶 DNA指导的DNA聚合酶 三、合成过程 RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA 逆转录病毒的生活周期 RNA 衣壳 被膜 逆转录酶 转录 转译 整合入宿主细胞染色体DNA 进入细胞 丢失被膜 丢失衣壳 逆转录 RNA RNA cDNA 衣壳蛋白 被膜蛋白 逆转录酶 分子生物学研究可应用逆转录酶，作为获取基因工程目的基因的重要方法之一，此法称为cDNA法。 以mRNA为模板，经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链。 试管内合成cDNA cDNA ?complementary DNA? 二、逆转录研究的意义 逆转录酶和逆转录现象，是分子生物学研究中的重大发现，是分子生物学重要工具酶。 逆转录现象扩充了中心法则，说明至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。 对逆转录病毒的研究，拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论。 滚环复制(rolling circle replication) 三、滚环复制和D环复制 某些低等生物的复制形式，如?X174和M13噬菌体等。 3?-OH 5?-P 5? 5? 5? 3? 3? 3? 3? 5 滚环复制 5 ?? 5? 3? 3? 5? dNTP DNA-pol γ D环复制(D-loop replication) 是线粒体DNA (mitochondrial DNA，mtDNA)的复制形式。 DNA损伤与修复 第五节 遗传物质的结构改变而引起的遗传信息改变，均可称为突变。 在复制过程中发生的DNA突变称为DNA损伤(DNA damage)。 从分子水平来看，突变就是DNA分子上碱基的改变。 一、突变的意义 （一）突变是进化、分化的分子基础 （二）突变导致基因型改变 （三）突变导致死亡 （四）突变是某些疾病的发病基础 二、引发突变的因素 （一）物理因素：紫外线(ultra violet, UV)、 各种辐射 UV （二）化学因素： 三、突变的分子改变类型 （一）错配 (mismatch) DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。 1.转换：发生在同型碱基之间，即嘌呤代替另一嘌呤，或嘧啶代替另一嘧啶。 2.颠换：发生在异型碱基之间，即嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤。 镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因 正常成人Hb (HbA)β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 （二）缺失 (deletion)、插入 (insertion) 1.缺失：一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。 2.插入：原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA大分子中间。 3.缺失或插入都可导致框移(frame-shift)突变。 框移突变是指三联体密码的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变。 谷 酪 蛋 丝 5’ ……G C A G U A C A U G U C …… 丙 缬 组 缬 正常 5’ ……G A G U A C A U G U C …… 缺失C 缺失引起框移突变 （三）重组(recombination) DNA分子内较大片段的交换，称为重组或重排。 由基因重排引起的两种地中海贫血基因型 四、DNA损伤的修复 修复(repairing) 是对已发生分子改变的补偿措施，使其回复为原有的天然状态。 光修复(light repairing) 切除修复(excision repairing) 错配修复(mismatch repairing) SOS