淋病等实验室诊断技术(玉林)解读.ppt

细胞培养法检测临床应用 敏感性：52－92％ 低 特异性: 99－100％ 高 缺 点：实验室条件和实验技术要求高， 费时，敏感性低 临床应用：“金标准”方法 方法学评价 沙眼衣原体感染的确证 沙眼衣原体感染的科研 分子生物学检测临床应用 敏感性：75－97％ 高 特异性: 98－100％ 高 缺 点：实验室条件和技术要求高， 成本高，费时，假阳性，抑制物 临床应用：临床和健康体检 沙眼衣原体感染的筛查 生殖器疱疹的实验室诊断   概述 生殖器疱疹是由单纯疱疹病毒(HSV)感染泌尿生殖器 及肛门部位皮肤粘膜而引起是一种复发性疾病, 是一 种常见的性传播疾病。 HSV是双链DNA病毒，属人类疱疹病毒α亚科。人类是HSV的唯一自然宿主。HSV有两种类型;单纯疱疹病毒1型(SHV-1)和单纯疱疹病毒2型(HSV-2)。多数生殖器疱疹是由HSV-2引起。HSV可呈慢性复法过程，尚无彻底治愈的方法。 概述 生殖器疱疹的复发可给患者带来很大的身体痛苦，影响其生活质量，并可能引起播散性HSV感染、病毒性脑膜炎、脊髓脊神经根病、盆腔炎综合征等一系列并发症。孕妇HSV感染影响生育，可引起子宫内新生儿的感染那，导致流产、早产、死产、新生儿死亡或发生严重疑症。 概述 传染源：生殖器HSV 感染者、亚临床感染或无症状派读者、未识别症状或不典型生殖器疱疹患者是生殖器疱疹的主要传播源 传播途径有水平传播和垂直传播。水平传播主要是性接触传播，垂直传播是指母-婴及母-胎儿间传播，包括子宫内感染和经产道感染。 标本采集 复发性生殖器疱疹病程1~2周,病毒排放持续平均时间4天;原发性病程2~3周,病毒排放持续时间12天。 1、疱液取材； 2、溃疡取材； 3、宫颈取材； 4、其他标本如尿道拭子，丘疹等。 标本采集 标本运送：如不能立即检测，应将标本洗入病毒运送液，置冰箱保持。 如当天检测可置4℃保存，如不能当天检测，应置-70 ℃保存 实验方法 1．分离培养法 2. 细胞学检查 3．直接免疫荧光法 4．单纯疱疹抗原酶联免疫试验 5．HSV-DNA或基因检测法 6．血清学检测 病毒分离培养 原理：培养法分离培养HSV，每天观察病毒对敏感细胞的细胞病变（CPE），初步确定病毒的存在。 方法：单层细胞的准备； 标本接种； 细胞病变的观察； 病毒传代； 鉴定与分型。 病毒培养 结果：培养超过4天后可以观察CPE，可初步确定HSV培养为阳性，如要确认需经过免疫学方法进一步鉴定证实。 注意事项： 1、细胞的敏感性（选敏感性好及活力强幼龄细胞）； 2、标本取材时不应使用消毒剂和润滑剂及藻酸钙拭子； 3、标本中病毒含量； 4、保存； 5、注意无菌操作，避免细菌和真菌污染 病毒培养 临床意义： 培养法是HSV检测的“金标准”，对病毒分离敏感、特异，生殖器疱疹患者的斑丘疹、水疱、脓疱、溃疡、结痂性皮损标本坐HSV培养的敏感性分别是25%、94%、87%、70%和27%。 细胞学检查 HSV感染细胞后,可使细胞产生特征性的病变。取疱液或溃疡渗液涂片，在显微镜下观察细胞的变化，如细胞出现气球样变或出现胞浆空泡，感染细胞相互融合成多核巨细胞，同时观察病毒包涵体，有助于诊断。 由于特异性差，目前不主张将细胞学检查应用于生殖器疱疹的诊断。 直接免疫荧光法 国内外有检测疱疹病毒的荧光单克隆抗体试剂市售。直接免疫荧光法检测简单，阳性结果为上皮细胞的浆和细胞核内可见亮绿色的荧光。本法易受取材和涂片技术的影响。目前，国外有疱疹病毒分型的单克隆抗体试剂供应，可用于病毒细胞培养鉴定和临床标本检测。 单纯疱疹抗原酶联免疫试验 近年，丹麦一厂家生产96孔单纯疱疹抗原酶联免疫诊断试剂盒，可检测水泡、溃疡和痂皮中的疱疹病毒。本法与细胞培养比较，敏感性为85.6％，特异性为97.8％。本法的缺点是疱疹病毒不能分型。 PCR检测 全国性病控制中心已开展了HSV的研究，他们采用细胞培养、荧光单克隆法和PCR法对生殖器疱疹进行了全面的研究，PCR－微孔板杂交法分型与病毒培养－单克隆抗体分型的阳性结果一致。PCR敏感、特异和快速，适用于生殖器标本中的检测。 血清学检测 血清学检测主要采用HSV的特异性的糖蛋白，可检测并区分血清中的抗SHV－1和SHV－2型抗体的免疫酶联试验。检测抗SHV抗体的血清试验可用于证实既往SHV的感染，主要用