新型光敏剂五聚赖氨酸-2-羰基酞菁锌药代动力学的初步的研究.pdfVIP

中文文摘 光动力学疗法（简称 PDT ）是一种发展中的治疗肿瘤的新方法，与传统的 肿瘤疗法如手术，化疗以及放射治疗等相比，具有许多无可比拟的优势。PDT 目前的研究热点是在抗癌光敏剂的开发上。五聚赖氨酸-2- 羰基酞菁锌 （ZnPc-(Lys)5 ）是一种新型两亲性酞菁锌，前期研究表明 ZnPc-(Lys)5 与其他两 亲性光敏剂相比不仅提高了肿瘤细胞摄取率，而且对肿瘤细胞光毒性大约提高了 20 倍，因此ZnPc-(Lys)5 有望成为一种理想的抗癌光敏剂。目前国内外文献关于 酞菁类衍生物光敏剂在生物体内分析研究报道很少,其游离浓度的测定未有报 道。 本文第一部分对五聚赖氨酸-2-羰基酞菁锌（ZnPc-(Lys) ）在荷瘤小鼠体内的 5 药代动力学参数和组织分布情况进行了研究。实验应用 SDS 增敏胶束荧光分析 法测定荷瘤（H22 ）小鼠血浆样品中ZnPc-(Lys)5 的浓度。ZnPc-(Lys)5 在血浆样本 中的线性范围为10 ~500 nmol/L，r =0.9993 ；检出限为3nmol/L，定量限为10 nmol/L ；相对回收率为 96.20% ~ 102.74% ；相对标准偏差均不超过 10% 。 ZnPc-(Lys)5 在组织样本中的线性范围为25 ~1250 ng/mL ；相对回收率为94.93% ~ 103.74%；相对标准偏差均不超过10%。荷瘤小鼠静脉注射ZnPc-(Lys)5 （1 mg/kg） 后，采用胶束增敏荧光分析法测定 ZnPc-(Lys)5 荷瘤小鼠血浆样品的荧光强度， 采用3P97 药代动力学程序求算其药代动力学参数。通过曲线拟合优度AIC 值等 作为拟合指标进行房室模型的选择，发现荷瘤小鼠尾静脉注射 ZnPc-(Lys)5 1 2 mg/kg 后，ZnPc-(Lys)5 在荷瘤小鼠体内的药代动力学行为符合权重系数为 1/C 的二室模型。t1/2α为2.07 h ，t1/2β为48.14 h ，表明ZnPc-(Lys)5 在荷瘤小鼠体内的 分布速度较快，而消除较慢。ZnPc-(Lys)5 在荷瘤小鼠体内组织分布由多到少顺序： 肝＞肿瘤＞肾＞肺＞心＞肠＞脾＞肌肉＞皮肤＞脑，脑内几乎没有分布。 本文第二部分通过对超滤法和溶剂沉淀法(分别采用冰丙酮、冰乙醇、三氯 乙酸、三氟乙酸为沉淀剂）沉淀血浆蛋白测定游离五聚赖氨酸-2-羰基酞菁锌 （ZnPc-(Lys) ）浓度的方法进行了比较。实验结果表明冰丙酮沉淀蛋白的方法更 5 适用于血浆中ZnPc-(Lys)5 游离浓度的测定。小鼠血浆中ZnPc-(Lys)5 线性范围为 v 10~500nmol/L, r =0.9993 。提取回收率为81.65% ~86.16 %，血浆蛋白结合率为 88.51%~92.80%。冰丙酮沉淀血浆蛋白的方法可用于血浆中ZnPc-(Lys)5 游离浓度 的测定。 本文第三部分建立了小鼠血浆中ZnPc-(Lys)5 浓度的HPLC 检测方法。血浆 样品经预处理后采用CNW C18(4.6 mm×250 mm，5 µm) 色谱柱分离，流动相： 甲醇-水（分别含有0.05 %三氟乙酸），流速：1.0 mL/min，柱温：25 ℃，荧光检 测器激发波长：610 nm,发射波长：690 nm 。此种方法检测，ZnPc-(Lys)5 在2-500 nmol/L 检测浓度范围内呈良好线性关系（r=0.9990 ），检测限为0.5 nmol/L，回收 率为86.90%-88.80 %，日内和日间RSD 均低于10 %。该方法灵敏、准确，适合 于血浆中五聚赖氨酸-2-羰基酞菁锌浓度的测定。 关键词：光敏剂; 酞菁锌衍生物; 五聚赖氨酸-2-羰基酞菁锌; 药代动力学; 分布; 游离浓度; 荧光光谱; 高效液相色谱法