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脑缺血大鼠少突胶质细胞变化特征的实验研究 中文摘要 脑缺血大鼠少突胶质细胞变化特征的实验研究 中文摘要 缺血性脑卒中具有发病率高、死亡率高、致残率高、复发率高、恢复缓慢的特点。 不管何种临床类型缺血性卒中，大多数情况下急性脑缺血都会影响到脑白质。尽管缺 血性神经元损伤的病理生理学机制已经得到了深入研究，但神经胶质细胞的缺血性损 OLG)，而且它是中枢神经系统的成髓鞘胶质细胞，在许多神经系统疾病中OLO对损 伤具有易损性，因而OLG损伤对髓鞘化的中枢神经系统纤维——白质的功能具有深 远的影响。与神经元一样，OLG对氧化应激、兴奋性毒性作用、神经营养因子缺乏 及凋亡通路的激活等有高度敏感性。越来越多证据表明，OLG是急性缺血性脑损伤 的靶细胞之一，0LG对缺血有选择易损性，在缺血应激下导致早期髓鞘缺失。少突 胶质谱系细胞对缺血缺氧的易损性表现为阶段特异性，不成熟的细胞较成熟细胞对缺 血缺氧损伤更具易损性。OLG对缺血具有选择易损性意味着卒中后仅仅针对神经元 死亡的病理生理学机制进行保护治疗并不能获得明显的疗效。尽管NMDA受体拮抗 剂在卒中治疗临床试验中不能改善患者预后的原因是多方面的，但其中晟主要的问题 可能与其不能防止OLG死亡和轴突损伤有关(两者均不表达NMDA受体)，在保护神 经元的同时兼顾地保护OLG显然有助于减轻神经功能缺损。 一、全脑缺血大鼠血液流变学变化 目的观察大鼠全脑缺血后血液流变学的动态变化。 方法采用SD大鼠四血管闭塞(4．vo)全脑缺血模型，4-VO后将大鼠随机分为 2d、4d、7d、14d和28d五个时间点及假手术组，每组8只；检测血液流变学指标、 脑组织含水量并在光镜下观察细胞形态学变化。 结果大鼠全脑缺血后血液流交学指标、脑组织含水量2d时即增高，至7d时达 到高峰，14d时逐渐恢复，28d时恢复至假手术组水平。与假手术组比较，4-VO后 2d、4d、7d有显著差异(P0．05)。 I 脑缺血大鼠少突胶质细胞变化特征的实验研究 中文摘要 二、脑缺血后髓鞘基因表达变化 mRNA、MOG 组，每组8只；用RT-PCR观察海马组织MBP mRNA表达的变化。 但与假手术组无显著差异，至7d时显著降低，并持续至29d时达到高峰。与假手术 组比较，缺血后7d、14d、28d有显著差异∞0．05)。 三、脑缺血大鼠少突胶质细胞变化特征 目的观察脑缺血大鼠皮质、海马、胼胝体少突胶质谱系细胞的动态变化规律及 脑缺血后BrdU(+)细胞能否定向分化成少突胶质谱系细胞。 和28d五个时间点及假手术组，每组8只：用组织芯片免疫组织化学检测皮质、海马、 胼胝体A285、04、CNPase蛋白表达变化，用免疫荧光双染色和激光共聚焦显微镜观 察BrdU—A285、BrdU一04、BrdU—CNPase双阳性表达情况。 减少到最低，14d时回升，28d时恢复至假手术组水平；与假手术组比较，脑缺血后 时回升，28d时恢复至假手术组水平：与假手术组比较，2d、4d有显著差异(Po．05)。 四、脑缺血条件下骨髓基质细胞定向分化成少突胶质细胞的实验研究 目的 观察体外培养的人胚胎骨髓基质细胞(MSCs)移植入全脑缺血大鼠胼胝体 ll 脑缺血大鼠少突胶质细胞变化特征的实验研究 中文摘要 内能否定向分化成少突胶质谱系细胞。 方法 无菌人胚胎股骨骨髓体外分离与培养，应用免疫荧光流式细胞仪鉴定 BrdU．A285、BrdU．04、BrdU．CNPase双阳性表达情况。 结果传代3次的人胚MSCs 阳性表达细胞仅0．14％；移植点附近可见BrdU标记的MSCs移植入脑缺血大鼠胼胝 体内存活。免疫荧光双染色显示，部分BrdU阳性细胞表达04，但无BrdU·A285、 BrdU．o旧asc双阳性细胞。 五、依达拉奉、茶多酚对脑缺血大鼠脑内少突胶质细胞影响作用 目的研究新型自由基清除剂依达拉奉及绿茶提取物茶多酚对OLG缺血反应性 的影响。 方法采用4．VO模型，依