用分子组织工程方法研究转化生长因子β_1对骨髓基质干细胞生物活性的影响.pdfVIP

苎!至垦查兰堡主笙墨 本文常用的缩略词表 cells BMscsBonemarrowstroIIIal 骨髓基质干细胞 TGF factors 转化生长因子pl plTransforminggr。wth modi medium DMEMDulbecco，sfied 一种培养基 eagle ne PBs PhosDhaLebuffercdsali 磷酸盐缓冲液 ALP Alkalinephosphatase 碱性磷酸酶 FcM Flow—cytometry 流式细胞仪 electron TEM Trans¨luminatingmicroscope透射电镜 SABci册uhistochemicalstaining 免疫组化法 Kb Kil。baseDaris 千碱基对 sodium sulfate 十二烷基硫酸钠 sDS dodecyl chainreaction 聚合酶链式反应 PCR P01vmerase TNF Tumornecrosis factor 肿瘤坏死因子。 BuP B0ne ic 骨形成蛋白 morphogenetprotein factoI‘ 胰岛素生长因子 IGF Insulin¨kegr。wth of t)eDartment0ralogy 第四军医大学硕士论文 用分子组织工程学方法研究转化生长因子夕。 对骨髓基质干细胞生物活性的影响 摘 要 分子组织工程学是将分子生物学与组织工程学有机结合，运用分了生 物学的理论和技术，从分子水甲研究细胞、组织诱导因了、生物材料及其 相互作用的关系，为研制能更有效地恢复、维持或改善病损组织或器官功 能的生物替代物奠定基础。 本研究以骨髓基质干细胞(BMSCs)作为靶细胞，TGF口．基因片段作为 目的基因，绎LipofectAMINE转染目的基因与靶细胞中，观察BMscs经基 因转染后的生物学特性。探讨BMscs作为基因治疗的靶细胞的可能性及 BMScs自身分泌的TGF卢．对其生物学特性的影响。 实验方法：载体pcDNA3一TGF卢．构建后，取新西兰兔骨髓，分离培养 转染BMscs。采用电泳检测pcDNA3TGF芦．构建是否成功；通过TGF卢。免疫 组化染色检测转染是否成功；运用形态学观察、透射电镜(TEM)、流式细 胞仪(FcM)、碱性磷酸酶(ALP)染色、Il型胶原免疫组化染色等方法，观 察转染后BMSCs增殖与分化情况。 实验结果：载体pcDNA3一TGF算。构建成功；TGF口。基因转染BMscs成功， 转染后BMscs表达TGF卢，至少能够持续4周：转染后的咖SCs增殖活性增 强，经G。稳定筛选后逐渐向软骨方向分化。对