碱性成纤维细胞长因子受体在牙周创伤愈合中的表达.pdfVIP

碱忖成纤维细胞生长凼子受体“牙州创伤愈合中的表达 碱嗤减纤维细胞生长因子受f{难牙周创伤廷洽中的表达 研究生张佃星 专业口腔内科学 导师杨丕山教授 摘 要 目的：碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与其受体的结合 在牙周组织的发育和创上愈合中起着重要的作用。采用免疫组化 1 技术，本研究观察牙周手术后创口愈合过程中bFGF受体FGFR 的表达情况，以便了解bFGF在牙周再生过程中的作用，同时为牙 周手术中外源性bFGF的合理应用提供理论依据。 t方法：随机选择4只牙周健康的成年杂种犬，其上颌两侧的 前磨牙(PI，P，P3)、第一磨牙(M1)和下颌两侧的前磨牙(P， P3，P4)、第一磨牙(MI)作为实验区牙。翻起颊侧粘骨膜瓣， 去除实验牙近中根颊侧牙槽骨至釉牙骨质界(CE3)下5mrn，制 作‘U”型骨缺损模型，刮除牙周膜和牙骨质，平整根面。按实 验设计分为4组：屏障膜组—在骨缺损表面放置ePTFE膜，冠方 的bFGF溶于少量生理盐水中，然后浸入与缺损大小相当的胶原 膜中，将胶原膜覆盖骨缺损区；bFGF+ePTFE膜组一先用bFGF 组的方法处理骨缺损区，后放置屏障膜；对照组—在骨缺损区既 不用bFGF处理，也不放置ePTFE膜。缝合，常规抗感染，术后 第1、2、3、4周以10％中性甲醛磷酸缓冲液处死动物并行内固 定，动物处死前1小时给动物腹腔注射BrdU(1 o 00mg／kg 分割包括牙齿、牙槽骨及软组织在内的实验用牙齿作为单个 碱性成纤维身}l胞生长吲予受体在牙周刨伤愈合中的表达 标本，以同样的方法继续固定48小时。EDTA脱钙，脱水，石蜡 包埋。制作厚和5“m的与平行于牙齿长轴的颊舌向连续切片。 分别以FGFRI的抗体和BrdU的抗体作为一抗，对组织切片行 ABC法免疫组化染色，用带目视测微仪的光镜对切片的免疫学反 应进行观察，对实验结果进行统计学分析。 结果：在ABC法免疫组化实验中，以DAB显色时，细胞 的阳性染色部位染为棕黄色(本研究中BrdU染色时为细胞核， FGFRl染色时为细胞浆)，阴性细胞的核为兰色，细胞膜(浆) 为无色。 1．BrdU染色发现在新生的牙周组织如牙周韧带细胞、血管 内皮细胞、成骨细胞和成牙骨质细胞的核上都有BrdU的标记， 在新生牙周组织的冠方中阳性标记率高，向根方逐渐降低。并且 以第1周时BrdU标记率最高(51．93％)，以后逐渐下降，至第4 周时最低(19．1I％)。 2．FGFR 1染色发现，在新生的牙周韧带细胞的细胞膜上 FGFR 1的表达率最高(76．83％)，其次是新生牙槽骨冠方的血管 内皮细胞(68．97％)和结缔组织中的成纤维细胞(68．46％)，最 低的是成骨细胞(35．64％)和成牙骨质细胞(32。79％)，在各时 间水平上都有这一趋势。在不同的时间水平上，以第1周时牙周 组织各类细胞膜上FGFR1的表达最活跃，为62．99％，以后逐渐 1的表达最不活 下降，至最后一个时间水平—．第4周时，FGFR 跃，为26．45％。 3．FGFR 1的表达与细胞核BrdU的标记率呈正相关关系。第 1的表达率与细胞 l周时，牙周组织各类细胞的细胞膜上FGFR 核BrdU的标记率均最高，随后，二者同步下降。 结论：在牙周手术后创伤愈合的过程中，牙周组织各类细胞 膜上FGFR1受体的表达与细胞的增殖状态呈正相关关系，即在 碱性成纤维细胞生长因了受体在牙周刨伤愈合中的表达 牙周术后创伤愈合的早期细胞增殖活跃时，细胞膜上FGFR1的 表达亦活跃，一周以后FGFR1的表达开始下降，因此，bEGF主 要在创伤愈合的早期