第三章抗体要点.ppt

五、免疫球蛋白基因的高突变性 免疫球蛋白基因的体细胞高突变通常在第二次抗原免疫后很明显。 抗体种类的转变也伴随着与抗原结合力（亲和力）的增加。亲和力的成熟事实上增加了产生免疫球蛋白多样性的可能性，至少产生1012 种可能的免疫球蛋白。 抗体的多样性（小结） 重组使得免疫球蛋白基因的不同片段混合。 重链和轻链的随机配对将遗传编码的多样性最大化。 VDJ和VJ片段的不严密连接，丰富了抗体的多样性。 高突变和亲和力的成熟也有利于产生免疫球蛋白的多样性。 第五节 抗体的发展 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 一、多克隆抗体（第一代抗体） 天然抗原物质往往具有多种不同的抗原决定簇 多个抗原决定簇——机体——多种抗体的混合物 多克隆抗体（polyclonal antibody） 在机体淋巴组织内可存在多种抗体形成细胞（B细胞），当受刺激后，对应一个抗原决定簇，每种B细胞可增殖化化为一种细胞群（克隆Clone），并分泌合成在理化性质，分子结构，遗传标记，以及生物学特性等方面相同的均一性抗体（单克隆抗体），多种抗原决定簇可刺激多种细胞克隆合成分泌各种不同的抗体（多克隆抗体）。 二、单克隆抗体（第二代抗体） 单克隆抗体是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体。 杂交瘤细胞既具有能大量无限生长繁殖的特性，又具有合成和分泌抗体的能力。 单克隆抗体 （monoclonal antibody, McAb） 1975年德国学者科勒（Koehller）和美国米尔斯坦（Milstein）用绵羊红细胞抗原免疫正常小鼠后，将能分泌特异性抗体的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，筛选，培养出既具有肿瘤细胞迅速生长繁殖特征，又具有B淋巴细胞分泌特异性抗体能力的杂交瘤细胞（hybridoma） ，其针对同一抗原可以连续不断地产生，具有高度特异性和专一性的抗体。 三、基因工程抗体（第三代抗体） 目前大多数单克隆抗体是鼠源的，在临床应用上受到限制。 80年初，随着人们对Ig基因结构、功能研究的深入，利用DNA重组技术，在Ig分子基因水平上对其进行切割，拼接或修饰，产生新型抗体，称为基因工程抗体。 嵌合抗体（Chimeric antibodies） 1984年，Morrion，从杂交瘤细胞分离出功能性可变区基因，与人Ig恒定区的基因连接，插入适当质粒，构建质粒载体转宿主细胞表达鼠-人嵌合抗体。 ????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 改形抗体（Reshaped antibody，Rab） Rab是指利用基因工程技术，将人抗体可变区（V）中互补决定簇（CDR）序列改换成鼠源单抗CDR序列，又称为CDR移植抗体（CDR grafting antibody）　 人源性抗体 通过非免疫途径，利用基因工程的手段，制备人源性的治疗用单克隆抗体。 现代生物学技术 抗体工程 噬菌体抗体库 下一堂课的内容为“补体” 思考题 绘图说明抗体的结构，并指出各部分的功能。 理解抗体的多样性的原因。 简述免疫球蛋白的功能。 掌握免疫球蛋白不同的酶切方式，以及每个片段的功能与整体活性的关系。 由于Fab为单价，可与抗体特异性结合，但是不能发生凝集反应（/phtml） * 二、免疫球蛋白的分子功能 （一）特异性结合抗原 （二）活化补体 （三）结合Fc受体 （四）通过胎盘 （一）特异性结合抗原 Ig最显著的生物学特点就是能够特异性地与抗原结合，这种特异性结合抗原特性是由其V区（HVR）的空间构型决定的。 Ig的抗原结合点由L链和H链超变区组成，与相应抗原上的表位互补，借助静电力，氢键以及范德华力等次级键相结合，这种结合是可逆的，并受到pH、温度和电解质浓度的影响。 不同的抗原可能有相同的抗原决定簇，一种抗体可以与两种或两种以上的抗原发生反应，此称为交叉反应（cross reactoion）。 抗原抗体的胶体特性与极性基的吸附作用 抗原与抗体之间有相对应的极性基，当二者结合为抗原抗体复合物后，就不能再与环境中水分子结合，因而失去亲水性能，成为憎水胶体系统。 它们在水溶液中的稳定性．主要依赖其表面电荷。此时如有一定浓度的电解质存在(如氯化钠生理溶液)，可以中和胶体粒子表面所带电荷，促使其发生凝集或沉淀。 可见反应 抗原抗体复合物 (疏水胶体) 电解质 抗原 (亲水胶体) 抗体 (亲水胶体