第三章抗原第四章抗体要点.ppt

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第三章、抗 原 抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 (antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC) 抗体的分类 一、根据有无明显抗原刺激分类 天然抗体(natural antibody) 免疫抗体(immune antibody) 母源抗体(materal antibody)或母体抗体: 从母体经胎盘、初乳或卵黄进入胎儿、幼畜或雏禽的抗体。 抗体的分类 一、根据与抗原反应的性质分类 完全抗体(complete antibody) 不完全抗体(incomplete antibody) 又称封闭抗体,能与抗原结合,但不出现可见反应。 封闭抗体与抗原结合后,影响完全抗体对抗原的结合和破坏作用。(抗原起到了保护作用) 抗体的分类 四、根据抗体作用的对象分类 抗菌抗体(antibacterial antibody) 抗病毒抗体(antiviral antibody) 中和抗体 抗外毒素抗体(antitoxin antibody) 溶血素(hemolysin) 抗抗体(antiantibody) 以提纯的免疫球蛋白免疫异种动物制备的抗体。 抗原——抗体(抗原)——抗抗体(抗体) 5、人工制备的抗体 多克隆抗体 : 多个抗原决定蔟——机体——多种抗体的混合物 单克隆抗体: 只针对某一特定的抗原决定蔟,纯度高的抗体 一、多克隆抗体(Polyclonal antibody,PcAb) 用抗原物质多次免疫动物,采取血液,分离血清,即为抗血清或免疫血清,该血清中含有多克隆抗体。 如大肠杆菌有菌体抗原、鞭毛抗原和荚膜抗原三中抗原成分,而每一种抗原成分又有多个抗原决定簇,每一个决定簇都能刺激一个相对应的B细胞分化增殖,产生抗体,故血清中是多种抗体的混合物。 二、单克隆抗体( monoclonal antibody ,McAb ) 克隆(clone):指由一个祖先细胞分裂繁殖而形成的一个细胞系,系内细胞基因和性状均相同。 McAb:由一个识别一种抗原决定簇的B细胞克隆产生的同源抗体,称为单克隆抗体。 (一)、单克隆抗体制备的基本过程 1、B细胞的制备:用抗原免疫小鼠 经抗原免疫的小鼠脾细胞(B细胞)能产生大量抗体,但在体外不能无限增殖。 2、骨髓瘤细胞的制备:体外培养 小鼠骨髓瘤细胞在体内、外可无限增殖,但不能分泌抗体。 (一)、单克隆抗体制备的基本过程 (二)单克隆抗体的优点 1、单一特异性(高度特异性) 与一个抗原决定簇反应 2、可重复性(高纯度) 抗体结构高度均一 3、效价高、成本低,并可大量生产 (三)、单克隆抗体的应用 2、免疫球蛋白的分子结构 轻链(light chain,L链) 由213~214个氨基酸组成个氨基酸组成; 轻链N端的109个氨基酸为V区,其余为C区; V区有3个高变区; 2、免疫球蛋白的分子结构 重链与轻链的三个高变区与抗原表位结合 2、免疫球蛋白的分子结构 功能区 在重链内部由4-5对二硫键形成4-5个封闭的环状区,称为功能区,分别为VH、CH1、CH2、CH3,IgM 和IgE 有 CH4; 轻链有两个功能区,分别为VL和CL。 2、免疫球蛋白的分子结构 2、免疫球蛋白的分子结构 功能区的作用为: VH 和 VL:是结合抗原的部位 CH1和 CL:具有遗传标志 CH2:有补体结合位点 CH3:与抗体的亲细胞有关 2、免疫球蛋白的分子结构 铰链区 位于CH1与CH2之间 易于弯曲(含有丰富的脯氨酸) J链和分泌成分 J链(joining chain) 可连接Ig单体形成二聚体、五聚体 2、免疫球蛋白的分子结构 分泌成分(分泌片) 为一种含糖的肽链:由粘膜上皮细胞合成和分泌 是分泌型IgA的辅助成分: 具有保护 IgA 的绞链区免受酶的降解,并介导IgA二聚体的转运 2、免疫球蛋白的分子结构 Fab片段:即抗原结合片断(antigen-binding fragment) 每个 Fab 片段由一条完整的轻链和重链的 VH 和 CH1 功能区组成。 具有抗体活性:可与抗原特异性结合 2、免疫球蛋白的分子结构 Fc片段:即可结晶片段:(crystallisable fragment) 生物学活性 选择性通过胎盘 活化补体 与某些免疫细胞结合 有利于IgA进入外分泌液 具有抗原活性 3、各类免疫球蛋白的特性与功能 一、IgG 1、为单体Ig,主要存在于血浆中; 2、在血浆出现稍迟,但含量高,维持时间长; 3、在人和兔,IgG可通过胎盘 4、有抗细菌、抗病毒、抗外毒素等作用; 5、可与K细胞、巨噬细胞等结合,杀伤肿瘤细胞等靶细胞 3、各类免

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