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AtHsfA1a对热胁迫下PCD相关基因启动子区结合的研究 蜂文江 (昆明学院 生命科学与技术系,云南 昆明 650214) 摘 要:近年来随着全球气温的不断升高,许多植物面临着很严峻的抵抗热胁迫伤害的挑战。植物在这种高温胁迫下会发生各种保护性的反应如热激反应(heat shock response,HSR),热激反应过程中能产生热激蛋白(heat-shock protein,HSP),这种蛋白能提高植物体对高温的耐受性。而调控这种蛋白表达的转录因子叫做热激因子((heat shock t ranscription factor , 简称HSF)。植物热激因子通常可以分为A、B、C三类,不同物种的HSFs有所不同但它们都有相同的结构域。其中A类热激因子可参与热激反应等胁迫应答和和植物发育调节,如拟南芥的热激因子AtHsfA1a就是其中一种。另外在高温胁迫中植物为维持内环境稳定还会发生细胞程序性死亡(PCD),它是由基因控制的细胞自主、有序的细胞死亡形式。但目前植物PCD的调控机制仍不是很清楚,也不清楚植物HSF与PCD是否有直接关系,更不清楚拟南芥热AtHsfA1a是否可以调控PCD,如何调控PCD。因此,本实验研究拟南芥热激因子AtHsfA1a对热胁迫下细胞程序性死亡相关基因启动子区结合的影响 ,对于揭示HSF与PCD的关系有重要意义。本实验以野生型和AtHsfA1a突变型拟南芥为实验材料,在39℃的热胁迫下,提取拟南芥叶片的总RNA,并用RT-PCR技术检测拟南芥热激因子AtHsfA1a的表达量。实验结果表明在热胁迫下野生型和AtHsfA1a突变型的AtHsfA1a都会表达,只是突变性的表达量明显低于野生型的。之后为了探究拟南芥热激因子AtHsfA1a与PCD相关基因(sus1,sus2和sus3)的启动子区是否有结合,在39℃的热胁迫下,通过染色质免疫共沉淀技术分析拟南芥热激因子AtHsfA1a与PCD相关基因(sus1,sus2和sus3)启动子区的结合情况,实验结果表明在热处理,经过经甲醛交联,加抗体的情况下野生型的拟南芥的热激因子AtHsfA1a 与PCD相关基因(sus1,sus2和sus3)启动子区在体内能结合,而突变型不能结合。通过本实验验证了拟南芥的热激因子AtHsfA1a 与PCD相关基因(sus1,sus2和sus3)之间存在了直接的联系,拟南芥的热激因子AtHsfA1a对热胁迫下细胞程序性死亡相关基因有调控作用。 关键词:热激因子AtHsfA1a; PCD相关基因; 热胁迫; 启动子区;染色质免疫共沉淀技术 AtHsfA1a on PCD under heat stress associated gene promoter binding studies Feng Wen-jiang (Department of Kunming Institute of life science and technology, Kunming, Yunnan, 650214) Abstract: In recent years, with the rising of the global temperature, many plants are facing severe resistance to heat stress injury challenges. Plant in under the high temperature stress will happen various protective responses such as heat shock response (heat shock response, HSR) and heat shock response can produce heat shock protein (heat-shock protein, HSP). This protein can improve the plant tolerance to high temperature. The expression of heat HSF transcription factor is called shock factor (ranscription).. The plant heat shock factor can be divided into three kinds: A, B, C, and the HSFs of different species are different, but they have the same structural domain.. Where a class a heat shock can be

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