TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白的原核表达及其在舞毒蛾幼虫体内的跨膜转导.pdfVIP

昆虫 学 报 融合蛋白的原核表达及 其在舞毒蛾幼虫体内的跨膜转导 周 洲 李永丽 源春彦 曲良建 河南科技大学林学院 河南洛阳 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 北京 摘要 目的为了探究滞育激素经昆虫取食的生物效应 需设计一种能够加速跨膜运输的融合蛋白 克服经昆虫消化 道的降解作用 方法本研究以分月扇舟蛾 滞育激素基因和穿膜肽编码序列为基 础 构建融合基因 然后以增强型绿色荧光蛋白 为标签 构建 在 载体中 在 诱导下 在大肠杆菌 中表达出 融合蛋白 再分别将表达有和融合蛋白的大肠杆菌 菌体拌入人工饲料经舞 毒蛾 幼虫持续取食 和 后 随机挑选试虫进行组织固定并制作石蜡切片 选取中肠 所在体段切片进行组织荧光分析 结果 诱导条件下 表达的融合蛋白的 分子量为 主要以包涵体形式表达 融合蛋白约占细胞总蛋白含量的 随着试虫取食含 融合蛋白饲料的增加 虫体组织的绿色荧光强度逐渐增加 取食 后 组织荧光强度达到最高 结论实验结果 说明融合蛋白可以通过消化道横向跨膜运输 到达虫体其他组织 且该过程与蛋白的摄入量成比例 关键词 舞毒蛾 滞育激素 穿膜肽 蛋白转导域 融合蛋白 跨膜运输 中图分类号 文献标识码 文章编号 基金项目 国家自然科学基金项目 国家高技术研究发展计划 计划项目 作者简介 周洲 男 年生 博士 副教授 研究方向为新型杀虫基因构建与利用 通讯作者 收稿日期 接受日期 昆虫学报 卷 滞育激素 是昆虫神经