家蚕P450基因CYP18A1的克隆、序列分析及转录活性.pdfVIP

昆虫 学 报 ， ， （）： !#$ %#’(’)’*+$ ,++$ !#$% ’’( )* + +, - .) /001 ’.).2343 家蚕!#$ 基因 !#-.$ - 的克隆、 序列分析及转录活性 ! ! 艾均文，王根洪，李艳红，余泉友，张学松，朱 勇 ，向仲怀 （西南大学生物技术学院，西南大学蚕学与系统生物研究所，农业部蚕桑学重点开放实验室，重庆 .’’,*3 ） 摘要：蜕皮激素对昆虫生长、发育和繁殖有重要调控作用，尤其对蜕皮和变态过程。利用OF@6@P 上登录的蜕皮激 素 羟基化酶候选基因 的氨基酸序列对家蚕 全基因组数据库进行 比对，发现了家 5 /01-.!- 2’(345 (’6+ 6Q70RS 3 蚕直向同源基因（ ），其完全编码序列经 检测和克隆、测序验证后，再以此为信息探针检索家蚕表达 B#D%B;BT MR2S5M 序列标签（ ， ）数据库进行拼接延伸，获得了一条包括 非翻译区在内的长度为 的 FKG#F??FH ?FUCF@$F DT? 80R )V * ,+, LG 序列，验证结果也表明与电子克隆序列完全一致（ 登录号为 ， 命名委员会将其命名为 $W17 OF@6@P 8X.*4(( S.)’ ）。该基因的开放阅读框为 ，编码 个氨基酸，含有包括 特征结构域在内的所有昆虫 /01-.!- * 3+ LG ).* S.)’? S.)’ 基因的 个保守结构域，其推定的分子量为 ，等电点为 。将该基因 序列与家蚕基因组序列进行 ) 3*Y3, PW ( Y). $W17 比对，结果表明该基因具有 个外显子，个内含子，外显子 内含子边界符合经典的 规则。同源性分析也发 3 ) Z OR27O 现家蚕 /01-.!- 与其他昆虫的直向同源基因具有较高相似性。用MR2S5M 方法对家蚕主要发育变态时期与组织进 行检测，显示出该基因的转录表达不仅具有时空特异性，而且在表达时期上与已报道的蚕体内蜕皮激素含量变化 有紧密的一致性。该研究进一步证实了/01-.!- 基因与昆虫体内蜕皮激素代谢平衡相关联。 关键词：家蚕；细胞色素氧化酶；/01-.!- 基因；克隆；序列分析；转录活性 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） [433