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基因工程的基本操作程序学案.doc
1.2 基因工程的基本操作程序
【自主学习】
基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:__________________的获取,
的构建,将目的基因________________,目的基因的
一、目的基因的获取
1.目的基因:主要是指_________________的基因,也可以是一些具有
的因子。
2.获取目的基因是实施基因工程的第一步。目的基因的获取方法主要有两种:①从自然界中已有的物种中分离出来 ②______________ _________。
3.基因文库——将含有___________________________片段,导入
中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。
基因文库根据其大小可分为__________ _____和__________________。
受体细胞是指接受______ ________的细胞,即表达载体导入的细胞。
基因工程常用的受体有____ _____、__________、__________________。
4.PCR技术扩增目的基因
原理:DNA复制
做法:已知__________________→据已知序列合成__________→DNA扩增
结果:扩增出__________________的目的基因。
5、人工合成法:如果基因比较小,又已知_______ ______,可借助__________ _____用化学方法直接人工合成。
二、基因表达载体的构建
基因表达载体的构建是基因工程的___ __。其中心内容是___________ ______,形成_____ ________,最后通过重组运载体将目的基因导入______ ________。
1.构建表达载体的目的:(1)使目的基因___________ __________,并可_________ ________,(2)使目的基因能够_________________________。
2.基因表达载体的组成:目的基因、________________、________________、____________ _________。
3.启动子是一段______________________ ____的DNA片段,位于基因的_____ _____,它是_____ _______识别和结合的部位,有它才能驱动基因转录出_____ ______,最终获得所需要的蛋白质。
4、终止子位于基因的______ ________,也是一段具有特殊结构的DNA短片段,相当于一盏红色信号灯,使转录在____________________________
5、标记基因的作用是____________________________________,从而将含有_______________ ___的细胞筛选出来。
三、将目的基因导入受体细胞
1、转化——目的基因进入________ _________内,并且在受体细胞内___________ ____和____ ____的过程。
2、将目的基因导入受体细胞的方法:①将目的基因导入植物细胞——_________ ______:双子植物或_______ _____
基因枪法:__________ _____
花粉管通道法。
②将目的基因导入动物细胞——________________________,常用的受体细胞:_________ _______
③将目的基因导入微生物细胞——____ ____处理细胞法,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为
)
四、目的基因的检测与鉴定
1检测对象:分子检测:①检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了
________ ____,可用________ _____;
②检测目的基因是否_______________,可用________________________
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