人肺癌脆性组氨三联体基因突变的研究.pdfVIP

英文缩略词 FHIT HistidineTriad Fragile HIT HistidineTriad ORF frame， openreading 1Hs glycine tris-hydroxypolylmethyl Reaction PCR Chain Polymerase SSCP strandconformation Single polymorphism SAS statistical analysissystem 郑州大学2002年硕士论文 ^肺癌脆性组氪酸三联体基因突变的研究 人肺癌脆性组氨酸三联体基因突变的研究 研究生 李春阳 导师 吴逸明 郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室 郑州450052 中文摘要 由于环境的恶化，人们：生活方式的改变，恶性肿瘤的 发病率有所升高，发病年龄趋于下降。肺癌是人类最常见 的恶性肿瘤之一，近年来在我国发病率、死亡率均呈上升 趋势，上升幅度居于首位。肺癌发病涉及到一系列基因， 如K—ra8等癌基因和／或p53、p16、Rb等抑癌基因异常改变 的复杂过程。 1996年Ohta等用外显子捕获法首次克隆到一个新的 histidinetriadFHIT)基因，FHIT 抑癌基因一F_HIT(fragile 基因表达异常多出现在与环境接触器官肿瘤中，被认为与 环境致癌因素有关，是环境致癌物作用的靶基因。并含有 编码组氨酸三联体的功能区，是将染色体位点不稳定性与 肿瘤联系起来的一个分子事件，在许多人类肿瘤组织或细 胞系，尤其是与环境接触器官的上皮肿瘤中该基因呈现高 郑』+I大学2002年硕士论文 人肺癌脆性组氢酸三联体基因突变的研究 频率的纯合性缺失或异常转录，呈现肿瘤特异性。 人类FHIT基因全长约5Mb，属于HIT基因家族，共有 10个外显子，编码一个约1．1KbmRNA，外显子5～9为编 码区，外显子5含有开放性阅读框的蛋氨酸起始密码，外 显子8包含编码HIT的结构区。FHIT基因与人类最常见 的染色体脆性部位FRA3B重合。Fhit蛋白是147个氨基酸 组成的分子量为16．8KDa的多肽，核心部分与酵母S．pombe 酶，通过使AP3A与AP4A浓度保持在一定比例从而对细 胞分化产生影响，与提高机体对致癌因素的耐受性有关。 与经典的抑癌基因不同，FHIT基因在转录水平只出现 一个或几个外显子的缺失，有时可见小插入，尚未检测到 点突变。本实验在本室动物实验基础上，采用PCR—SSCP 及DNA测序方法，研究肺癌组织FHIT基因DNA水平变 异，为进行循环DNA中FHIT基因变异研究及FHIT基因 变异对肺癌预警作用可能性研究提供基础资料。 方法 收集肺癌患者(30例)、肺良性病变(7例)手术标 本，离体20min内迅速放入液氮保存。应用DNAClub及 OMIGA软件设计分析FHIT基因外显子5特异性引物，采 郑州大学2002年硕士论文 人肺癌脆性{主i氨酸三联体基因突变的研究 用PCR扩增目的基因，应用单链构象多态性分析方法及 DNA序列测定技术检测FHIT基因变异。 结果 30例肺癌患者中有7例出现FHIT基因变异，阳性率 23．3％；其中鳞癌28．6％(6／21)，腺癌(1／6)，而癌旁组织及 肺良性病变组