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亚慢性砷暴露对小鼠脑组织TR表达的影响 硕士生姓名：张璇 指导教师：朴丰源教授 专业名称：劳动卫生与环境卫生学 摘要 背景：砷是自然界存在的有毒类金属元素，广泛分布于岩石、土壤和水环境 中。很多研究显示，砷能引起人类及动物包括损伤学习和记忆功能在内的神经系 IV基因、蛋白 统毒性。本课题组前期实验结果表明，砷暴露可显著抑制脑CaMK 的表达及学习记忆相关基因e-Fos，JurtB的表达，并伴有LTM形成抑制以及小鼠的 运动学习能力降低。我们推测砷可能通过抑制神经元CaMKⅣ的表达，干扰CREB 的磷酸化活化，导致记忆蛋白c．Fos，JunB表达下调，从而影响LTM形成。那么， 砷又是如何抑制CaMKⅣ的表达呢? 目的：观察砷对小鼠脑组织甲状腺激素受体(删基因和蛋白的表达影响，为阐 明砷的神经毒作用机制以及防治砷的神经毒性危害提供靶标依据。 方法：SPF级小鼠50只，按体重将小鼠随机分为饮用水对照组、lAs203 ppm 染毒组、2 50 AS203染毒组、4AS203染毒组、4As203+1mg／kg牛磺 ppm ppm ppm 酸保护组。通过自然饮用含不同浓度As203蒸馏水的方式使小鼠染砷，保护剂是以 灌胃方式给予，连续染毒60天后取脑组织。行为学试验测试砷暴露小鼠的学习记 忆能力，以及用基因芯片技术和PCR技术检测小鼠脑组织甲状腺激素受体(TR)基因 的差异表达，并进一步用Westernblot方法证实TR蛋白水平表达。采用SPSSll．5统 计软件，用单因素方差分析(A_NOVA)，比较各染砷组与对照组间的统计学差异， 两组间比较用LSD法分析，以P0．05表示统计学差异显著。 结果：跳台实验结果显示，与对照组比较，实验组小鼠错误次数增多，从 平台跳下的潜伏期缩短，差异有统计学意义(氏O．05)。暗箱实验结果显示，与 对照组比较，实验组小鼠错误次数增多，由明箱进去暗箱的潜伏期缩短，差 异有统计学意义(P0．05)。Morris水迷宫实验结果显示，砷暴露组小鼠的逃避 潜伏期明显长于对照组，差异有统计学意义(P0．05)。基因芯片结果显示，与 对照组相比，各染砷组小鼠大脑和小脑组织TRD基因表达均显著下调，尤其4 ppm 组下调更明显泸o．05)z而各组之间小鼠大脑和小脑组织TRu基因表达没有差异 Time (胗O．05)。RealPCR定量检测结果显示，砷染毒组小鼠大脑和小脑组织中TR[3 blot检测结果显示，与 基因相对表达量与对照组相比均明显下调伙0．05)。Western 对照组相比，染砷组小鼠大脑和小脑组织中TRpl蛋白表达量随着染砷剂量的增加 呈现降低趋势，差异有统计学意义(尸O．05)。并且，抗氧化剂牛磺酸对砷导致TR 基因和蛋白表达下调有拮抗作用(户O．05)。 结论：亚慢性砷暴露可影响小鼠的学习记忆能力和抑制大、小脑组织甲状腺 IV 激素受体中TRpl基因及蛋白的表达。TRIn可能是砷暴露小鼠脑组织CaMK IV基因和蛋白的 基因和蛋白表达下调的靶基因，可能通过介导XRIn干扰CaMK 表达从而影响小鼠的学习和记忆功能。此外，牛磺酸可以拮抗砷对TRl31基因和蛋 白水平表达的抑制作用。提示，砷导致TRpl基因和蛋白水平的下调可能与砷的氧 化应激作用有关。 关键词：三氧化二砷神经毒性 甲状腺激素受体牛磺酸