人支气管上皮细5—脂氧合酶表达与4—氨基联苯的活化及细胞毒性.pdf

摘要 [目的】 结合能肯定SLO介导4一氨基联苯氧化反应的体外酶系 统实验与4一氨基联苯对HBE5一LOX蛋白表达、细胞毒性和DNA损伤 影响的细胞实验研究，初步探讨细胞内5一LOX对外源化学物的代谢 情况，试图为LOX作为细胞色素P450氧化代谢外源化合物的替代途 径提供进一步的依据。 【方法】体外酶系统实验：在适宜条件下，大豆脂氧合酶(SLo) 与4一氨基联苯(4-ABP)等在酶体系中开始反应后，用分光光度法在 特定波长检测反应体系中反应终产物生成情况，并计算SLO对4一氨 基联苯氧化代谢速率和NDGA对代谢的抑制率。 细胞实验：通过MTT试验检测不同浓度的4一氨基联苯对HBE存 活率的影响，分别以不同浓度的4一氨基联苯染毒HBE24小时，用 胞凝胶电泳实验检测各组的DNA损伤情况。最后检测特异性5一LOX 抑制剂(从861)对5一LOX蛋白表达和多种特异性酶抑制剂对DNA损 伤的影响。 [结果】在过氧化氢参与下，SLO可以协同氧化4一氨基联苯，氧 化后生成偶氮联二苯。LOX经典抑制剂NDGA可抑制该协同氧化作用， 且在一定范围内呈剂量效应关系。4一氨基联苯可以使HBE内5一LOX 蛋白表达增加，从一86l对5一LOX蛋白表达基本没有影响：4一氨基联 苯可以对HBE产生明显细胞毒作用和DNA损伤，AA-861和萘普生可 以明显抑制4一氨基联苯毒性和DNA损伤情况。 [结论】在过氧化氢参与下，SLO可以介导4一氨基联苯协同氧化， NDGA可以抑制该协同氧化作用。5一LOX在HBE内的蛋白表达是可以 经4一氨基联苯调节的，特异性5一LOX抑制剂AA-861对其蛋白表达 无明显影响。HBE主要通过5一LOX介导4一氨基联苯协同氧化，产生 抑制该反应。 关键词5一脂氧合酶，协同氧化作用，蛋白表达，细胞毒性，DNA 损伤 Ⅱ ABSTRACT Theeffectsof to5-1ipoxygenase IObjectivesl 4-aminobiphenyl and andDNA werebeen expressioncytotoxicity damage protein inI-IBE the thatcallaffirmthe investigatedcells，withexperiment b SlLOminmethe ‘dationotof4 mediatedmedlated vltro-enzynnc aminobiphenyl 4=ammoblphenyloy 5-LOXand orderto themetabolismofxenobiotic system，in approach by furtherthat isthealternativeforthe provideprooflipoxygenase pathway mediated P450． oxidationofxenobioticsbycytochrome reaction suitable vitro