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褪黑素抗突变、抗肿瘤作用离体实验研究 摘要 是松果体分泌的一种吲哚胺类激素。其作用相当广泛，可诱导自然睡眠、延缓 衰老、提高机体免疫力，近年来，其预防、治疗肿瘤和延缓癌症发展的作用越 来越受到人们关注。本文通过Ames试验和肿瘤细胞培养来观察褪黑素的抗诱变 及抗肿瘤作用，并初步探讨其机理。 5000u 皿DMSO为阴性对照，每皿分别加入Melg、500pg、50“g、5pg、0．5 ug，每个剂量组三个平行样。37℃培养48—72小时，观察不同剂量组的回变菌 落数。加S9和不加s9分别进行，试验重复两次。(2)Mel抗突变试验：平板 掺入法，不加S9时，TA98用12．5u iJ．g、500u g、50ug、5ug、0．5u g的Mel，37℃培养48—72小时，观察不同 剂量组的回变菌落数。每个剂量组三个平行样，试验重复两次。加S9时，TA98 外培养的MCF一7人类乳腺癌细胞，分别进行细胞毒性试验，不同剂量组肿瘤细 胞生长状况观察(包括细胞分裂指数、细胞贴壁率、细胞生长曲线、染料排除 试验、平板克隆形成试验及光镜下凋亡细胞鉴定)和免疫组化检测肿瘤相关基 因bcl一2和p53的表达。 结果：(1)Mel致突变试验：加与不加S9，各剂量组与阴性对照组相比，其回 l 间细胞贴壁率未见显著性差异。培养16小时，各组间细胞贴壁率均不同 增大，细胞贴壁率减小。(6)Ic。的№l使眦F一7细胞的倍增时间由对照组 之间的细胞存活率均有显著性差异(／K0．05)，且随Mel剂量增大，细胞存活率 有减小趋势。(8)接种细胞数分别为50个／孔、100个／孔和200个／孔时，各 剂量组之间克隆形成数有显著性差别(尺O．05)，随№l剂量增大，细胞克隆数 前致突变物所致的回复突变，具有抗突变作用。(3)在一定剂量范围内Mel可 降低肿瘤细胞活力，抑制肿瘤细胞增殖。(4)Mel可抑制癌基因bcl一2的表达 并促进抑癌基因p53的表达，以阻断细胞周期，诱导细胞凋亡，从而对肿瘤细 胞增殖发挥抑制作用。 关键词：褪黑素、抗突变、抗肿瘤、MCF一7、细胞凋亡、免疫组化、基因表达 of actions melatonin’S on investigation Experimental invitro andantitumor antimutation Abstract named a obiective：Melatonin．chemically has mlestO kindofindolaminehormonesecreted extensive by gland．It mainly pineal and increase inducenatural SCTICSCCnCe