九香虫抗菌肽CcAMP1的分离纯化和抗菌活性检测.pdfVIP

： 昆虫 学 报ＡｃｔａＥｎｔｏｍｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，Ｊｕｎｅ２０１５，５８（６）６１０－６１６ ｄｏｉ：１０１６３８０／ｊｋｃｘｂ２０１５０６００４ 九香虫抗菌肽 ＣｃＡＭＰ１的分离纯化和抗菌活性检测 １，２， １，２ １，２ 李尚伟 ，赵柏松 ，杜　娟 （１．贵州大学昆虫研究所，贵州山地农业病虫害点实验室，贵阳５５００２５； ２．贵州大学，昆虫资源开发利用特色重点实验室，贵阳５５００２５） 摘要：【目的】从药用昆虫九香虫Ｃｏｒｉｄｉｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ中分离纯化抗菌肽，为进一步开发九香虫抗菌肽资源及深入挖掘 九香虫的药用功能奠定基础。【方法】用大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ和金黄色葡萄球菌Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ混合物作 诱导源刺激九香虫产生抗菌肽，对血淋巴进行提取、凝胶过滤层析、固相萃取及反相色谱纯化，活性组分经质谱测 定。对分离得到的这种抗菌肽进行人工合成，并进行抗菌活性检测。【结果】本研究获得一种九香虫抗菌肽 ＣｃＡＭＰ１，由１７个氨基酸残基组成，分子量为１９９７．３７ｕ，带 １个正电荷，表面有５个疏水氨基酸。对人工合成的 ＣｃＡＭＰ１进行抗菌活性检测表明，该抗菌肽与九香虫血淋巴一样对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌和大肠杆菌等 革兰氏阴性菌都有较好的抗菌活性，且对革兰氏阴性菌的抗菌活性更强。【结论】从九香虫中分离得到具有较强抗 菌活性的阳离子抗菌肽ＣｃＡＭＰ１，有较大的开发利用价值。 关键词：九香虫；抗菌肽；抗菌活性；分离；纯化 中图分类号：Ｑ９６６　　文献标识码：Ａ　　文章编号：０４５４６２９６（２０１５）０６０６１００７ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ａｎｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｅｐｔｉｄｅＣｃＡＭＰ１ｆｒｏｍ Ｃｏｒｉｄｉｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｈｅｍｉｐｔｅｒａ： Ｄｉｎｉｄｏｒｉｄａｅ） １，２， １，２ １，２ ＬＩＳｈａｎｇＷｅｉ ，ＺＨＡＯＢａｉＳｏｎｇ ，ＤＵＪｕａｎ （１．ＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＰｅｓｔ ＭａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆＭｏｕｎｔａｉｎｏｕｓＲｅｇｉｏｎ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥｎｔｏｍｏｌｏｇｙ，ＧｕｉｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ５５００２５， Ｃｈｉｎａ；２．ＳｐｅｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＩｎｓｅｃｔＲｅｓｏｕｒｃｅＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ＧｕｉｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕｉｙａｎｇ５５００２５，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ａｉｍ】Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙａｉｍｓｔｏｉｓｏｌａｔｅａｎｄｐｕｒｉｆｙａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｓ（ＡＭＰｓ）ｆｒｏｍａｎｏｆｆｉｃｉｎａｌ ｉｎｓｅｃｔＣｏｒｉｄｉｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓｓｏａｓｔｏｌａｙａｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇＡＭＰｒｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｔｈｉｓｓｐｅｃｉｅｓ．【Ｍｅｔｈｏｄｓ】Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｍｉｘｔｕｒｅｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉａｎｄ ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓａｓｔｈｅｓｏｕｒｃｅｏｆｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｔｏｐｒｏｄｕｃｅＡＭＰｓ．ＴｈｅｈｅｍｏｌｙｍｐｈｏｆＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｕｓｉｎｇｇｅｌｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｓｏｌｉｄｐｈａｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ａｎｄｒｅｖｅｒｓｅｄｐｈａｓｅ ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＲＰＨＰＬＣ）．Ｔｈｅａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｗａｓｄｅｔｅｒｍ