家蚕微孢子虫ADPATP转运蛋白的原核表达及间接免疫荧光定位分析.pdfVIP

： 昆虫 学 报ＡｃｔａＥｎｔｏｍｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，Ｍａｒｃｈ２０１４，５７（３）３００－３０７ ＩＳＳＮ０４５４６２９６ 家蚕微孢子虫ＡＤＰ／ＡＴＰ转运蛋白的原核表达 及间接免疫荧光定位分析 １，＃ ２，＃ ２ ２ ２ ２ １，２， 党晓群 ，林立鹏 ，李春峰 ，潘国庆 ，李　田 ，龙梦娴 ，周泽扬 （１重庆师范大学动物生物学重点实验室，重庆４０１３３１；２西南大学，家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆４００７１６） 摘要：【目的】家蚕微孢子虫ＮｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓＡＤＰ／ＡＴＰ转运蛋白可能参与搬运宿主细胞的能量。本研究克隆家蚕 微孢子虫ＡＤＰ／ＡＴＰ转运蛋白基因，并进行原核表达、抗体制备及间接免疫荧光定位，为控制和防治家蚕微粒子病 提供理论基础。【方法】通过同源序列比对鉴定家蚕微孢子虫ＮｂｏｍｂｙｃｉｓＡＤＰ／ＡＴＰ转运蛋白序列，采用生物合成 的方法将编码３段面向膜内侧肽段的核酸序列拼接合成，在其两端引入Ｂｇｌ 和Ｓａｌ 酶切位点，克隆至ｐＵＣ５７载