klotho基在残余肾模型大鼠中的表达及肾安颗粒的干预作用.pdfVIP

中文摘要 肾性骨病(ROD)是慢性肾脏病的主要并发症之一，对患者的生 存质量和生存时间有着重要影响。由于肾脏结构和功能的破坏导致肾 脏羟化酶系的活性降低，1，25(oH)：VitD，的生成相对或绝对不足， 一种与衰老相关的基因，主要在肾小管、脑脉络膜和甲状旁腺表达， 尤以肾皮质远曲小管表达最为强烈。 KL基因缺陷鼠可出现一系列与 人类“肾精亏虚证’’相似的衰老表型变化。 研究证实， KL在慢性肾 脏病(CKD)肾组织中的表达明显下调，而KL下调可导致骨质疏松， 骨代谢的激素，在ROD发生过程中起重要作用。那么，KL是否通过调 控这些蛋白而参与发生ROD呢?如果能够证实这一假说，将进一步阐 明RoD的发病机制并为临床治疗提供新靶点。本研究采用大鼠5／6肾切 颗粒(复方淫羊藿苷、黄芪甲苷、大黄葸醌提取物)的干预作用，预 期结果不仅能深化对ROD发病机制的认识，还将在一定程度上揭示中 药防治ROD的作用机理。 实验一大鼠残余肾模型的制备 目的：探讨大鼠残余肾并肾性骨病模型的制备方法。 方法： Wis C组大鼠以戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，行2／3左肾切除，1周后再 次行右肾切除。各组大鼠均予正常饮食，A组和B组饮蒸馏水，C组 左肾切除术后第二天开始加磷酸二氢钠饮水。各组大鼠造模术后1月 算内生肌酐清除率(Ccr)。 结果：造模术后1月，A、B两组大鼠活泼好动，毛色整齐光亮， 体重增加；C组精神萎靡，安静不喜动，毛色杂乱，体重变化不明显。 结论：5／6肾切除加高磷饮水1月可以导致残余肾模型大鼠钙磷 代谢异常，继发PTH升高，提示并发ROD。 关键词：5／6肾切除高磷饮水肾性骨病 实验二 残余肾模型钙、磷代谢的变化及 肾安颗粒的干预作用 日的：探讨残余肾模型大鼠钙、磷代谢的变化及肾安颗粒的干预 作用。 方法：将第一部分实验中的造模组大鼠32只随机分为4组，即 以骨化三醇溶液灌胃；E、F组分别以中、高浓度肾安颗粒灌胃；A、 B、c组以等量生理盐水灌胃。灌胃容量lml／1009／日，总疗程8周。 血前1天代谢笼收集24h尿，测IJcr并计算Ccr。 结果：各组大鼠存活情况：用药期间c组和D组各死亡1只，余 与用药前比较明显升高(P0．05)，P3+较用药前略下降但无统计学意 义(P0．05)，D组ALP与用药前比较降低(PO．05)，iPTH与用药 o．05)；E、F两组间上述各指标比较无显著性差异(Po．05)。 结论：肾安颗粒具有稳定残余肾模型大鼠肾功能、提高HCB、改 善钙磷代谢、抑制甲状旁腺机能亢进的作用。 关键词：肾安颗粒骨化三醇钙磷代谢 I¨ 实验三KI．OIflO基因在残余肾模型大最的表达 及肾安颗粒的干预作用 目的：探讨KL基因在残余肾模型大鼠的表达及肾安颗粒的干预 作用。 ． 方法：分组方法及用药同第二部分。用药结束后，处死全部大鼠， 取肾脏和股骨，肾组织常规包埋切片染色行光学显微镜检查，以双能 tern 鼠肾脏KLothomRNA的表达；采用Wesblot检测肾脏KLotho蛋 白、股骨FGF-2 OPG表达；免疫荧光检测股骨FGF-23表达。 ． 结果：骨密度：C组与A、B两组比较明显降低，E、F、D组与C 组比较明显升高(P0．05)，E组与D组比较略有升高，但无统计学 Western 显差异(PO．05)；D、EjF三组表达明显低于C组(P0．05)；E tern 组表达低于D组和F组(Po．05)。Wesblot及免疫组化检测 tern 组表达高于D组(PO．05)。Wesblot及免疫组化检测OPG：C 达的下调，FGF-23表达升高，BMP-7、OPG表达降低；肾安干预后， 结论：KL基因