针灸对ad模型鼠海马工aβ降解相关酶的影响研究.pdfVIP

针灸对AD模型大鼠海马区A B降解相关酶的影响研究 本课题来源于国家自然科学基金项目：益肾调督法对hi)模型大 体损伤在AD级联反应的作用及针灸保护机制研究。 目 录 中文摘要……………………………………………．．I II hbstragt…………………………………．………．．I I 英文缩略词表………………………………………．．VI 前言………………．．……………………………．．1 刚 百………………··……………………………一1 实验研究…………………………………………．．…4 1实验设备和试剂…………………………………．．．．4 2实验动物和方法……………………………………．5 3 PreP和NEP的免疫荧光法检测………．………………．．7 4实验结果…………………………………………8 3 讨论………………………………………………1 1 A 3 D与阿尔茨海默病………………………．．………1 2关于AD的清除途径和相关降解酶……………………．．14 3 “益肾调督”法治疗阿尔茨海默病………………．……21 结论……………………．………………………．．24 参考文献……………………．………………………25 附录………………………………………………31 1综述……………………………………………31 2研究生期间发表的论文………………．．……………．42 致谢……．．………………………………………．43 中文摘要 目的：D淀粉样蛋白(hD)是构成阿尔茨海默病特征性病理改变之 一老年斑的核心物质，因此减少hp的过量生成或促进其加速降解， 减少Ap的聚集、沉降，是改善阿尔茨海默病病理进程的重要途径之一。 根据目前已发表的研究文献，有关AD生成途径方面的研究已有了一定深 度的探索，而有关hD降解方面的研究还需要更进一步深入。hp在细胞 内主要是依靠自噬溶酶体与泛素蛋白酶体途径清除，在细胞外以及线粒体 内则是经生物活性分子，即蛋白降解酶降解。目前已发现的hD的降解酶 包括脑啡肽酶、前序列蛋白酶、内皮素转化酶、胰岛素降解酶、血管紧张 素转换酶、纤溶酶和基质金属蛋白酶一9等。本课题从AD降解的方面进行 研究，选取脑啡肽酶和前序列蛋白酶作为研究指标，通过观察针灸百会穴 和双侧肾俞穴对这两种降解酶在大鼠海马CAl区表达的影响，探讨“益肾 调督”的针灸疗法治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。 S 方法：选用4个月月龄的雄性Witar大鼠作为研究对象。所有大鼠 i 经Morr S水迷宫筛选后，将符合条件的60只大鼠随机分为四组，即模型 组、假手术组、治疗组和正常组。模型组采用双侧海马一次性注射凝聚态 Ap，哪制备AD大鼠模型，假手术组采用相同的手术方法在颅内注射与A p。圳等量生理盐水制备。治疗组选取百会穴和双侧肾俞穴进行针刺(长 处行温和灸，持续15min。该疗法1次／天，6天为1个疗程，疗程间休息 1天，共治疗2个疗程。其他三组同步喂养，不予其他处理。治疗结束后， 各组选取10只进行指标检测。本次研究采用免疫荧光法检测各组大鼠海 马CAl区NEP和PreP的表达情况。 结果：经过两个疗程的治疗后，用免疫荧光法检测发现：(1)在大鼠 海马CAl区，模型组NEP的表达较正常组明显降低，其差异具有统计学意 鼠海马CAl区Prep的含量与模型组比较有显著提高(P0．01)。 结论：针灸“益肾调督”法可以通过上调大鼠海马CAl区NEP和PreP