大鼠染铝对神经为学及Nrf2ARE途径影响的研究.pdf

·中文论著摘要· 大鼠染铝对神经行为学及Nrf2／ARE途径影响的研究 目 的 铝(A1)是一种低毒元素，但在体内大量蓄积时也可产生多种毒作用，神经 组织对铝尤为敏感，易导致神经元损伤而造成学习和记忆方面的缺陷，氧化应激 是公认的一种中毒机制，铝对神经系统的毒作用与脂质过氧化密切相关。有研究 认为，铝可促进脑组织的脂质过氧化反应，这是其发挥神经毒作用的重要机制之 一。虽然铝本身不具有氧化性，但它可增强过渡态金属对机体的氧化损伤，特别 是增强铁催化的活性氧(ROS)的生成，影响Nrf2／ARE通路，进而导致氧化应激， 对细胞产生毒害作用。 本研究将在现有工作基础上，建立大鼠铝暴露模型，通过观察动物学习记忆 能力改变，脑组织细胞内GSH含量和活性氧生成水平，Nrf2／ARE通路与GCS的基 因和蛋白表达水平，结合神经细胞超微结构的异常变化，运用神经行为学、组织 化学、分子生物学和组织形态学等多种技术手段，从脂质过氧化角度来阐明 Nrf2／ARE通路在铝所致中枢神经系统损伤中的作用。 方 法 本研究通过饮水染毒90天建立铝暴露大鼠模型，观察染铝动物学习记忆能力 因和蛋白表达水平。穿梭箱及Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力。采用透 射电镜技术观察大鼠海马组织神经元和神经突触超微结构；脂质过氧化试剂盒法 PCR法检测Nrf2 检测MDA、GSH含量及GSH—Px、GR和y—GCS的酶活性：Rea卜time mRNA水平；western 及丫一GCS blot法检测Nrf2及y—GCS蛋白表达。 娃 甲 宝口7卜 随着染铝剂量的增加，大鼠血铝水平逐渐升高；Morris水迷宫定位航行实验 中，染铝大鼠寻找平台的潜伏期延长，游泳距离延长而运行轨迹更趋复杂，Morris 水迷宫空问探索实验中，染铝大鼠寻找原隐蔽平台的趋向性及策略性降低，进入 目标象限的次数和在目标象限的停留时问减少；随着染铝剂量的增加，染铝组动 物穿梭箱实验电击次数增多，电击时间延长，而主动逃避时间和主动逃避潜伏时 问均延长；随着染铝剂量的增加，大鼠海马组织MDA含量逐渐升高而GSH水平逐 mRNA及蛋白表达水平随着染铝剂量的增加而增加。 酶活性升高。海马Nrf2、Y—GCS 随着染铝剂量的增加，大鼠海马神经元和神经突触的超微结构损害程度增加。 结论 1．铝暴露引起大鼠血铝含量增加，海马系数下降； 2．铝暴露可以造成大鼠学习记忆能力受损； 3．铝暴露可以使大鼠海马组织中MDA含量升高，还原型GSH水平降低， mRNA及蛋白表 GSH—Px及GR活性降低，丫一GCS活性升高。海马细胞Nrf2、Y—GCS 达增加； 4．铝暴露可以损害大鼠海马神经元和神经突触的超微结构。 关键词 铝；学习记忆；海马；氧化应激；Nrf2／ARE通路 2 英文论著摘要 theneurobehavioraland Ef．fectsofaluminumon Nr亿／ARE inrats pathways ectiVes obj ofaluminum alow