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康脑灵Ⅲ号对大Alzheimer病影响的实验研究
提要
8)注入大鼠海马致阿尔茨海默病
目的:应用B一淀粉样蛋白(Beta—amyloid,A
B、
NMDA2B受体的表达和细胞凋亡、组织形态改变的影响。
方法:选用淫羊藿、山药、白扇豆、黑豆、银杏叶、山楂、陈皮等中药。组成康
分为生理盐水对照组(简称生理盐水组),AD模型组(简称模型组),康脑灵IⅡ号低剂
量治疗组(简称低剂量组),康脑灵III号高齐U量治疗组(筒称熹剂量组),苯甲酸雌二
醇治疗对照组(简称雌激素组)。每组12只。将体外孵育的AD,。定向注入大鼠双
13天后灌药的同时分别让各组大鼠在MorriS水迷宫进行定位航行实验(历时5天,
每天分上、下午两个时间段),测其第4及第5天上午的逃避潜伏期,计算其均数作
为学习成绩。第5天下午进行空间探索试验,计算平台所在象限内的游泳时闰占120
秒内游泳时间的百分比以及记录2min中内大鼠搜索平台的全过程录像,检测记忆能
力。结束后处死动物,取材,对大鼠海马进行HE、刚果红、尼氏染色病理学观察,
用免疫组织化学方法对海马结构及盘状回分子层突触素的表达进行分析,免疫组化法
检测海马结构$100
B、NMDA2B受体及Caspase一3的表达。
结果:随着训练的进行,各实验组的逃避潜伏期均不断缩短,但下降的速率不一
致。摸型组的逃避潜伏期明显延长,与生理盐水组榴£j二有显著差异(P0.01):平台
所在象限的时间百分比与生理盐水组相比也有显著差异(P0.05)。HE染色显示,模
型组大鼠海马CAl--CA4区及齿状回神经元数量较生理盐水组明显减少,可见散在的
神经细胞胞质浓染,核固缩。康脑灵珏I号治疗组及雌激素治疗组神经元数量较模型组
增多,胞质浓染神经元少见。透射电镜下,模型组海马CAl区神经元较少,可见部分
神经细胞膜皱缩,胞体缩小,核膜完整,核染色质电子密度增强。高剂量组大鼠海马
CAI区异常神经元较模型组明显减少。生理盐水组仅针道处海马CM锥体细胞带略有
紊乱、中断、胶质细胞少量,海马、齿状回突触素免疫染色出现明显的免疫板层分布,
模型组海马CAl区及齿状回平均积分光密度显著低于生理盐水组(P0.01),补充雌激
素及康脑灵III号高剂量组18天后,可显著升高Syp的积分光密度值,高剂量组可恢
复至正常水平,与模型组相比,有显著性差异(PO.05),但低剂量组与模型组相比无
差异。生理盐水组S100B细胞数与模型组相比,有显著性差异(PO.05),高剂量组
S100 B
0细胞数明显减低,与模型组相比,差异有显著性,低剂量组、雌激素组S100
区、CA3区锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层均有表达,以CAl区最强,CA3区次之,
齿状回较弱,各组大鼠海马NR2B受体免疫反应强度比较,雌激素治疗组最强,次为
生理盐水组、康脑灵III号低剂量组、康脑灵III号高剂量组、模型组,模型组和其余4
组相比,有显著性差异(P0.05),雌激素组、低剂量治疗组、高剂量治疗组和生理
一3蛋白的表达明显增加,与生理盐水组比较有显著差异(P0.01),给予康脑灵ⅡI
号及雌激素治疗后Caspase--3蛋白的表达显著减少,与模型组相比,高剂量组、雌
激素组和低剂量组均有显著性差异(PO.01)。
结论:康脑灵III号能有效地改善A
13。。所致AD大鼠认知功能障碍:通过调节海
马、齿状回神经元突触密度,增强Syp的表达并参与调节神经元突触可塑性,改善学
习记忆功能;通过调节$100
B的表达,抑制A
B诱导的海马炎症损伤反应;通过上
调海马中NR2B受体的表达,影响长时程增强效应及突触的可塑性,改善学习记忆功
样可以有效逆转AD。。;的毒性作用,防治Alzheimer病。
关键词阿尔茨海默病(AD):康脑灵ⅡI号;动物实验
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