[Hg(SCN)4]2-与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用.pdfVIP

2011 年 第 56 卷 第 6 期：396 ~ 406 《中国科学》杂志社 论 文 SCIENCE CHINA PRESS [Hg(SCN) ]2−与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱 4 及其分析应用 田伦富, 刘忠芳, 孔玲, 胡小莉, 刘绍璞* 发光与实时分析教育部重点实验室, 西南大学化学化工学院, 重庆 400715 * 联系人, E-mail: liusp@ 2010-09-07 收稿, 2010-12-02 接受 国家自然科学基金、发光与实时分析重庆市重点实验室(2006CA8006)和西南大学大型仪器设备开放基金资助项目 摘要 在pH 1.0~4.5 的稀硫酸介质中, [Hg(SCN) ]2− 配阴离子与人血清白蛋白(HSA)、α-糜蛋白 关键词 4 酶(α-Chy)、牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lyso)和γ-球蛋白(γ-G)等蛋白质反应形成复合物, 此 蛋白质 [Hg(SCN) ]2− 时将导致共振瑞利散射(RRS) 的显著增强, 也能引起吸收光谱的变化和荧光猝灭, 同时还观察 4 2− 共振瑞利散射 到圆二色(CD)光谱特征的改变. 本文主要研究[Hg(SCN)4] -蛋白质复合物的RRS 光谱特征、适 吸收光谱 宜的反应条件和影响因素, 以及分析化学性质, 并以[Hg(SCN) ]2−-Lyso 体系为例, 结合吸收、荧 4 荧光猝灭 光和圆二色光谱的变化, 对复合物的结合位点、结合模式以及散射增强的原因进行了讨论. RRS 法具有较高的灵敏度, 它对不同蛋白质的检出限在 4.6~10.8 ng/mL 之间, 据此建立了 以[Hg(SCN)4]2− 配阴离子作探针测定人血液和尿液中蛋白质的新方法. 金属离子及其配合物与蛋白质的结合作用不仅 理也会与汞( Ⅱ)离子有所差异. 因此研究汞( Ⅱ)配阴 影响蛋白质的结构和构象, 也与蛋白质的活性和生 离子与蛋白质的相互作用同样具有重要作用. 物功能密切相关. 汞及其化合物对环境、人和动物的 共振瑞利散射(RRS)光谱法是20 世纪90 年代发 健康危害极大, 研究它与蛋白质的相互作用对于了 展起来的分析技术[14,15], 它对生物大分子的非键合 解其生物功能和致毒机理有重要作用. 但是目前的 作用, 如缔合、聚集、偶极-偶极作用、氢键作用、 研究工作偏重于汞( Ⅱ)离子本身与蛋白质的作用, 包 静电引力、疏水作用和芳基堆集作用等作用力以及分 [1~3] [4] [5,6] 括一些使用紫外光谱法 、荧光法 、电化学法 、 子大小、形状和构象变化较为敏锐,