单分子病毒三维可控操作方法.pdfVIP

2013 年 第 58 卷 第 15 期： 1456 ~ 1462 《中国科学》杂志社 论 文 SCIENCE CHINA PRESS 单分子病毒三维可控操作方法 ①② ①* ① ① ① ①③ 张常麟 , 刘连庆 , 王越超 , 王文学 , 董再励 , 李广勇 ① 中国科学院沈阳自动化研究所, 机器人学国家重点实验室, 沈阳 110016; ② 中国科学院大学, 北京 100049; ③ Department of Electrical and Computer Engineering, University of Pittsburgh, Pittsburgh 15261, USA * 联系人, E-mail: lqliu@ 2012-12-19 收稿, 2013-03-14 接受 国家自然科学基金和中国科学院与国家外国专家局创新团队国际合作伙伴计划资助 摘要 单个病毒的三维操作对自下而上开展单分子尺度的细胞免疫学研究具有重要的意义, 关键词 然而受操作工具及操作方法的限制, 该问题一直未能得到很好的解决. 以基于原子力显微 病毒 镜的纳米操作机器人为基础, 开展了针对单个病毒分子的三维操作研究, 具体包括: 高均匀 三维操作 分散性病毒样品制备方法, 基于局部扫描的病毒三维操作结果实时检测策略, 以及微观尺 纳米操作机器人 高分辨率表征 度下病毒三维空间的定点放置实现. 实验结果表明, 本文提出的操作方法与技巧, 不仅能够 实现单个病毒分子在三维空间内的可控定点拾取与释放, 还可与二维操作方法相结合, 构 建出全病毒分子的三维纳米结构, 实验结果验证了所提方法的正确性和有效性, 从而为自 下而上的细胞免疫学开展提供了可行的技术途径. 病毒是细胞内最小的寄生者, 在生物学和医学 对宿主的侵染, 并通过单分子的功能变化让人们更 上有着极其重要的研究意义. 很多重要的疾病都与 为深刻理解宏观生物现象. 鉴于自下而上研究的优 病毒密切相关, 如HIV[1]和HBV[2]就分别是导致艾滋 点, 这种思路很早就引起了生物学界的密切关注, 早 病和肝炎的感染病毒; 同时病毒又能作为一种十分 在 2001 年, 美国著名的生物学家 Overbaugh 和 重要的载体[3]来进行疾病的治疗, 如病毒载体携带治 Bangham[8]在美国著名杂志 Science 上发表论文, 指 疗基因进入肿瘤细胞, 在肿瘤细胞作用下病毒的衣 出在现阶段免疫学研究中对于感染和免疫机理的认 壳裂解, 释放出治疗基因, 达到基因治疗[4] 的目的. 识都是依据病毒引起的变化占主导时分析而来, 需 因此如何监测病毒对细胞的侵染过程就成为当今科 要一种能够针对单个病毒进行操作的方法, 通过定 学研究的前沿热点之一[5,6]. 传统研究病毒侵染细胞 量化的监测这种变化让人们更加深刻理解宏观的生 的方法是在隔离间中使用大量的病毒侵染培养皿或 物现象, 而目前阻碍这种自下而上研究的瓶颈正是 培养瓶中的群体细胞, 然后在显微镜下观察细胞形 针对单个病毒分子的分离、操作、搬运能力. 态随时间发生的变化. 这种自上而下的集群平均方 法[7]得到的结果无疑是正确的. 然而却忽略了病毒的 1 病毒纳米操作研究概况 个体性差异, 单