茶叶中几种常规成分检测方法的比较分析.pdfVIP

湖南省茶叶学会2007年学术年会论文集 茶叶中几种常规成分检测方法的比较分析 刘淑娟钟兴刚粟本文 (湖南省茶叶研究所·长沙·410125) 摘要：茶叶中的氨基酸、茶多酚和咖啡碱是构成茶叶滋味的重要组成部分，其含量的多少及成分 的组合直接影响茶叶的品质。因此准确监测分析茶叶中氨基酸、茶多酚和咖啡碱等的含量十分必要。 本文就茶叶中这几种成分的分析检测方法做了较为详细的分析比较。 关键词；茶叶；氨基酸；茶多酚：咖啡碱：检测方法 茶叶中含有丰富的营养元素，其中包含16种人体必需的氨基酸及茶多酚、咖啡碱等。氨基酸既 是人体健康的必要元素，也是茶汤鲜味的主要来源。其中，精氨酸、苯丙氨酸等都可转变成茶汤中 的香气物质或作为香气前体。茶多酚属多酚类物质，是一种新型的天然抗氧化剂，具有清除自由基、 防癌治癌、抗疲劳、抗辐射等功能。咖啡碱是茶叶的主要成味物质和生理活性成分，具有增加肾脏 血流量、强心、利尿、兴奋神经中枢、消除疲劳等生理作用和保健作用。近几年，许多学者致力于 茶叶成分的分析检测，对茶叶成分的测定方法进行了改进。得到一系列准确适用的茶叶检测方法。 本文主要对茶叶中氨基酸、茶多酚及咖啡碱三种主要常规成分的检测方法进行较为详细的比较分 析． 1氨基酸含量的测定 1．1氨基酸总量测定法 氨基酸总量测定的经典方法有酮量法和茚三酮比色法。通常，大多采用茚三酮比色法，但此法 数据重复性不高。夏静和罗守进通过对影响氨基酸测定的提取参数进行正交试验，改进了氨基酸的 提取方法，提高了结果的稳定性和重复性，同时比原来的提取方法节省时间【11。随后，他们把按此 法提取的液体进行游离氨基酸组份分析，发现此提取方法同时适用于氨基酸组分的测定。 1．2氨基酸组分的分析方法 氨基酸组分分析方法大致可分为纸谱分析法、离子交换树脂柱层析法、薄层层析法、氨基酸自 动分析仪测定法、高效液相色谱法。而茶氨酸因其特殊的理化性质，其测定法又另辟他径，现已出 现碱式碳酸铜沉淀法、强酸性阳离子交换树脂层析、柱上层析、薄层扫描、紫外光吸收光谱法，毛 细管电泳法[21等检测手段。现在氨基酸组分分析方法中最常用的是氨基酸自动分析仪法和高效液相 色谱法，以及80年代发展起来的毛细管电泳法。 1．2．1氨基酸自动分析仪法 氨基酸自动分析仪法是利用先进的仪器进行组分测定的方法。其测定分析程序可分为两种，一 是采用测定茶氨酸的专用测定程序，该方法最为常用。成本较低，所用的钠盐洗脱缓冲液价格便宜 且国内有售，其分析结果可以满足一般工作需要；不足之处是该方法不能一次性分离茶氨酸和其他 18种氨基酸，需采用二次分副引，且不能分离检测出包括谷氨酰胺、天门冬酰胺在内的酰胺类物质。 二二是生理体液法。采用生理体液改进程序在氨基酸自动分析仪上测定茶叶中游离氨基酸，不仅可分 湖南省茶叶学会2007年学术年会论文集 离检测出28种氨基酸，而且能很好地分离茶氨酸和谷氨酰胺。但此法试剂昂贵，检测过程中手续较 繁锁，适用于有特殊需要的科研。总的来说，氨基酸自动分析仪法结果准确、快速。但是仪器比较 昂贵、试剂消耗较大【4】。 1．2．2高效液相色谱法(HPLC法) 高效液相色谱法的基本原理是利用预柱衍生试剂将氨基酸衍生为具有荧光性的衍生物，再通过 检测器来测定氨基酸。高效液相色谱法应该是目前应用最为广泛的检测方法。该技术的关键是选择 有效的衍生试剂【5】。随着氨基酸专用衍生剂和专用分析柱的发展，HPLC测定法发展很快。其中 c分析氨基酸的方法，该方法所使用的衍生剂 AccQ．Tag方法【6J是wate琏公司1994年开发了柱前衍生}妇PI 是目前最优秀的衍生剂。朱松和王洪新研究了邻苯二甲醛(0EA)柱前自动衍生．紫外检测茶氨酸的肿LC 法，该法处理简单、快速、定量准确和重复性好，对操作无特殊要求171。2005年，李银花、刘仲华、黄 建安等建立未衍生化高效液相色谱一蒸发光散射检测器咂LsD)测定茶叶中茶氨酸的方法，克服了HPLC 法常遇到的问题[sl。2006年，施倩、陈林、张正竹等人研究了光电二级管阵列检测器结合阳?U颓0定I， 茶氨酸的方法[91，该方法可以对每个洗脱组分进行光谱扫描，经计算机处理后，得到光谱和色谱结合的 三维图谱。其中吸收光谱用于定性分析，色谱用于定量分析。 1．2．3毛细管电泳法 毛细管电泳法是20世纪80