固本平喘汤对慢肺合并肺纤维化大鼠细胞外基质影响的研究.pdfVIP

中文摘要 研究目的 在临床应用固本平喘汤防治慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺纤 维化(PF)并取得良好疗效的基础上，进一步研究该方对COPD合并 连蛋白(LN)含量的影响，探讨固本平喘汤防治COPD合并PF的作用机 制，为临床应用提供理论依据。 研究方法 80-2 1．动物和分组：将体重1 009大鼠6o只，雌雄各30只，随 机分为正常组对照组、模型组、西药组、固本平喘汤小剂量组、大剂 量组，每组12只。 0×55×7 2．动物模型制作：将12只大鼠置于特制熏烟箱(6 0cm3) 2 内，每9只香烟相接，一端固定于熏箱顶，点燃下端，燃毕换另1 0％ 只，每日48只，每周7d，连续4周。第5周将除正常组外大鼠以1 0 水合氯醛(0．36ml／1 09)腹腔注射麻醉，颈前剪毛后碘伏常规消毒， 行颈正中切口，钝性分离暴露气管，经气管软骨环间隙向心端穿刺一 次性注射器注入博莱霉素生理盐水溶液0．2ml(约博莱霉素4mg／kg)， 立即将动物直立并旋转鼠板，使药液在肺内均匀分布，缝合皮肤，常 规消毒，待动物自然苏醒后置笼内常规饲养。造模后第2天开始用药， 正常组及模型组均予等体积生理盐水灌胃，2次／日，西药组给予腹 腔注射地塞米松0．3mg／1009，1次／日，固本平喘汤(炙麻黄、苦杏 仁、甘草、紫苏子、白芥子、莱菔子、黄芩、地龙、淫羊藿、补骨脂、 巴戟天、黄芪、丹参、川芎)大、小剂量组分别给予免煎冲剂4ml(根 据人与大鼠药物剂量换算公式，设计药物剂量，浓缩成含生药2．79／ml 的免煎冲剂)、lml(药物浓度同上)灌胃，2次／日，以上各组均给 药28天。 3．检测方法和观测指标：①一般情况观测大鼠的活动度、对外 界反应的灵敏度、皮毛光泽、饮食、饮水、体重、死亡情况。②HA、 LN、PCIII检测于第8周，经10％的水合氯醛0．36ml／1009腹腔麻醉 后，抽取外周血，严格按照试剂盒说明书采用酶联免疫吸附法检测大 鼠血浆中HA、Lbl、PCIII水平。③病理切片形态学观察分批处死大 鼠后，迅速取出右肺中叶，10％中性福尔马林溶液中固定，乙醇梯度 脱水，二甲苯透明标本，浸蜡，包埋，切片，分别行HE染色，观察 肺泡炎、肺纤维化程度以及在3个高倍镜下统计支气管黏膜下成纤维 细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数。 4．所有结果采用均数±标准差(；±s)表示，采用SPSSlO．0软件 进行均数单因素方差分析，P0．05即认为有统计学意义，P0．01有 显著性差异。 研究结果 1．正常对照组皮毛光滑，身体健壮，饮食、活动、体质量增长正 常。模型对照组皮毛干枯稀疏，精神不振，反应迟钝，进食、活动均 减少，剧烈运动后出现喘息症状，体重较造模前略有增加，个别体重 下降。西药组开始尚可，后期出现皮毛于枯，活动及饮食均减少。固 固本平喘汤对慢阻肺合并肺纤维化大鼠细胞外基质影响的研究 本平喘汤大-1＼剂量组皮毛尚可，身体较壮，活动及饮食较正常，体重 明显增加。 2．正常组大鼠肺内结构均正常，细支气管周围炎性细胞浸润不明 显，血管壁肌层无增厚，肺泡间隔无水肿、炎症及纤维化表现，肺泡 内无明显渗出。模型组可见急性渗出性炎，有浆液性物质渗出，充满 肺泡间隔内，部分肺泡结构破坏，肺泡融合，成纤维细胞、淋巴细胞、 胶原纤维大量聚集。西药组与中药大、小剂量组病理过程同模型组， 但纤维化病变程度及范围均较模型组小(见附图1至5)。 3．模型组第8周外周血中PC III、HA及LN含量明显高与同期正常 组，PO．01。西药组、中药小剂量组、中药大剂量组第8周外周血中 小剂量组相比无明显差异性，均P0．05。