玉米赤霉醇特异性单克隆抗体及其胶体金检测试纸的研制.pdfVIP

核 农 学 报 文章编号 玉米赤霉醇特异性单克隆抗体及其胶体金 检测试纸的研制 刘 媛 文孟棠 张 霄 徐重新 杨晶祎 张留娟 王 恒 何 鑫 梁 颖 郑 勤 夏兴霞 刘贤金 江苏省食品质量安全重点实验室农业部食用农产品安全监控重点开放实验室江苏 南京 摘 要为了研究国内制备的玉米赤霉醇单克隆抗体与其同系物玉米赤霉烯酮交叉反应严重实际检测 存在假阳性的问题本试验开展了玉米赤霉醇特异性识别单克隆抗体及其胶体金检测试纸的研制工作 试验采用玉米赤霉醇 羧丙基醚与牛血清白蛋白偶联免疫雌性 系小鼠利用单克隆抗体 技术完成杂交瘤融合并用非竞争及竞争法对阳性克隆进行鉴定 杂交瘤诱生腹水后经亲和 纯化用于 胶体金标记制作玉米赤霉醇胶体金检测试纸 融合细胞经筛选最终对 株杂交瘤 细胞建株结果均为 型 其中 诱生腹水效价高达 对玉米赤霉醇抑制中浓 度 为 检测灵敏度 为 线性检测范围在 对同系物玉米赤霉烯酮的交叉反应率小于 试验研制的玉米赤霉醇胶体金试纸检测阈值为 检测时间为 本研究制备了一种新型玉米赤霉醇特异性单克隆抗体并研制了以单抗 为基础的玉米赤霉醇胶体金快速检测试纸为玉米赤霉醇残留快速检测提供了灵敏便捷的新方法 关键词玉米赤霉醇单克隆抗体玉米赤霉醇 羧丙基醚玉米赤霉烯酮胶体金检测试纸 玉米赤霉醇 在我国的商品名为 目前玉米赤霉醇的残留检测方法主要是以液相 畜大壮 是一种有效的激素类动物生长促进剂上 色谱气相色谱及其质谱联用为代表的大型仪器分析 方法 色谱法灵敏度高可准确定性定量但通 世纪 年代在我国被广泛推广 作为外源性激素 低浓度的玉米赤霉醇可促进牛羊蛋白质合成但对人 常需要复杂的前处理步骤且检测成本高并不适合大 体生殖系统发育和血液中甲状腺素水平的变化有影 量样本的快速筛查检测而免疫分析方法则可以弥补 这一不足 抗体作为免疫分析的关键试剂 目前 响 也有研究显示玉米赤霉醇会刺激人类乳腺肿瘤 细胞的体外生长与分裂 在家畜饲养中使用该生 已有 家实验室报道了玉米赤霉醇单克隆抗体的制 长促进剂可在动物肝肾等组织中积蓄或随尿液代谢 备 年 等 率先采用 半 排出其药物残留也可随环境食物链等影响人类的健 琥珀酸酯与牛血清白蛋白偶联以及 康水平 年我国农业部第 号公告明确规定 羧丙基醚与人血清白蛋白偶联用于制备 单克隆 禁用于所有食品动物所有可食动物组织及尿液 抗体 在国内王鹤佳等 和魏万贵等 分别采用