油菜LEAFYCOTYLEDON2(BnLEC2)基因的克隆及表达分析.pdfVIP

核 农 学 报　 ２０１４，２８（１２）：２１７５～２１８３ ２１７５ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 文章编号：１０００⁃８５５１（２０１４）１２⁃２１７５⁃０９ 油菜 ＬＥＡＦＹ ＣＯＴＹＬＥＤＯＮ ２ （ＢｎＬＥＣ２） 基因的克隆及表达分析 １ １ １ １ １ １ ２ 谭河林 　 王莉欢　 李　 云　 兰　 杰　 唐倩莹　 叶文雪　 向小娥 １ （ 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室，江苏 南京　 ２１００９５； ２南京农业大学动物科学类国家教学示范中心，江苏 南京　 ２１００９５） 摘　 要：ＬＥＡＦＹ ＣＯＴＹＬＥＤＯＮ ２（ＬＥＣ２）为具有Ｂ３ 结构域的ＤＮＡ 结合蛋白家族的成员，是调控胚胎形 成、种子储藏蛋白代谢和脂肪酸代谢的重要转录因子。 本文对四倍体甘蓝型油菜ＢｎＬＥＣ２ 基因进行了 克隆，并分析了白菜ＢｒＬＥＣ２、甘蓝ＢｏＬＥＣ２和甘蓝型油菜ＢｎＬＥＣ２ 同源基因的进化及其表达模式。 结果 表明，油菜、白菜和甘蓝ＬＥＣ２ 同源基因在进化上较为保守；但部分白菜和甘蓝ＬＥＣ２ 同源基因的表达发 生沉默。 ＢｎＬＥＣ２ 同源基因表达模式与其对应的白菜和甘蓝ＬＥＣ２发生明显改变，前者主要在种子发育 的中期高水平表达，这与油菜种子油脂等储藏物质的积累期重叠。 表明ＢｎＬＥＣ２ 同源基因通过改变其 表达模式影响油菜种子储存物质的积累。 这些结果初步揭示了多拷贝ＢｎＬＥＣ２ 对油菜种子储存物质调 控的协同表达模式。 关键词：甘蓝型油菜；ＢｎＬＥＣ２基因；基因克隆；进化分析；转录分析 ＤＯＩ：１０１１８６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００⁃８５５１２０１４１２．２１７５ ［７－８］ 　 　 我国是油料生产大国，更是油料消费大国。 目前， 七步酶促反应循环完成的 。 尽管现已对脂肪酸代 我国自产油料作物仅提供植物油消费总量的４０％左 谢途径中部分关键酶的分子生物学、酶学特性，以及生 右，随着我国生活水平的不断提高导致我国油料供给 化过程较为清楚，但是脂肪酸代谢是受复杂调控网络 ［１］ 问题日益突显 。 油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）是我国第一 控制的，目前对于种子油脂合成过程中的调控机制却 ［９］ 大油料作物，近年来，尽管我国油菜新品种不断推广使 知之甚少 。 得油菜籽单位面积产量得到一定提高，然而进一步提 目前，已从模式植物拟南芥中发现参与植物油脂 升空间有限。 在我国耕地面积逐年下降的趋势下，已 代谢调控 的转录因子有 ＷＲＩＮＫＬＥＤ１ （ＷＲＩ１）、 不能通过增加种植面积方式来增加油菜籽产量。 现今 ＦＵＳＣＡ３ （ＦＵＳ３）、ＬＥＡＦＹ ＣＯＴＹＬＥＤＯＮ２ （ＬＥＣ２）和 我国油菜品种平均油脂含量约４０％，明显低于含油量 ＬＥＡＦＹ ＣＯＴＹＬＥＤＯＮ１ （ＬＥＣ１） 等［１０－１３］。 其 中， 达４２％ ～４７％的外国油菜品种［２－３］。 因此，在种植面 ［１１］