M13-04实验四细菌淀粉酶的测定 环境工程微生物学课件.ppt

实验四细菌淀粉酶的测定 一、实验目的 1. 了解淀粉酶的作用特点， 2.掌握测定方法。 二、实验原理 淀粉酶是指一类能催化、水解淀粉分子中糖苷键的酶的总称。主要包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、糖化酶和异淀粉酶等。本实验为淀粉酶的定性测定，活性污泥混合液中的淀粉酶将淀粉水解为糊精（或其他淀粉的水解物），淀粉遇碘呈蓝色，随着蓝色逐渐消失而成为棕色反应物，这时可根据淀粉酶作用后淀粉溶液与碘反应时蓝色物消失的速度，来衡量酶活力的大小。 细菌淀粉酶在固体培养基中的扩散实验是利用点种法判断该细菌是否产生淀粉酶。 三、实验材料、器皿 加压蒸汽灭菌器、 培养皿、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、 药物天平、 培养箱、水浴锅、接种环、 培养基、 菌种：枯草杆菌、大肠杆菌、活性污泥等。 四、主要步骤 1. 活性污泥混合液中的淀粉酶活性的测定。 (1)按右侧表顺序在试管中加入各种物质。 2.细菌淀粉酶在固体培养基中的扩散实验 （1）牛肉膏蛋白胨淀粉培养基：牛肉膏 0.3g 蛋白胨1.0g NaCl 0.5g 　淀粉 0.2g 琼脂2.0g 水100mL pH 7.4～7.8 灭菌条件：121℃（相对蒸汽压力0.103