M13-08实验八总大肠菌群数的测定 环境工程微生物学课件.ppt

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实验八 总大肠菌群数的测定 一、实验目的* 1. 了解大肠菌群的数量指标在环境领域的重要性; 2. 学会总大肠菌群的测定方法。 * 该实验是综合性实验内容之一。 二、基本原理 大肠菌群是一群需氧或兼性厌氧的、在37℃培养24~48h能发酵乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。它们普遍存在于肠道中,且具有数量多、与多数肠道病原菌存活期相近、易于培养和观察等特点。该菌群包括肠道杆菌科中的埃希氏菌属、肠杆菌属、柠檬酸细菌属和克雷伯氏菌属。大肠菌群数是指每升水中含有的大肠菌群的近似值。通常可根据水中大肠菌群的数量来判断水源是否被粪便所污染,并可间接推测水源受肠道病原菌污染的可能性。 三、主要内容 1.多管发酵法(MPN法) (1)培养基的配制: a.乳糖蛋白胨培养基(供多管发酵法的复发酵用)配方(半成品或称脱水培养基):取35g(3倍浓缩则加量配制)加热溶解至1000mL水中(烧杯),分装后灭菌(115℃,相对蒸汽压力0.072MPa)灭菌20min) 。  b.伊红-亚甲蓝培养基(供多管发酵法的平板划线用)配方:取36g加热溶解至1000mL水中(烧杯),分装后灭菌(灭菌条件同上)。 (2)初发酵试验 a.水样:原水(10ml、1ml)、10-1 ~ 10-2浓度

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