瘤内注射重组人管内皮抑素对小鼠Lewis肺癌移植瘤抑瘤作用的研究.pdfVIP

ffIIIIrl l I Ilrl II IIII II IIf Y1 787086 瘤内注射重组人血管内皮抑素 i 对小鼠LewS肺癌移植瘤抑瘤作用的研究 研究生： 王丽芳 专业：肿瘤学 导师： 王宝成教授 中文摘要 目的 观察经皮穿刺瘤内局部注射重组人血管内皮抑素(恩度，Endostar)及联合顺铂 对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的抑瘤效果及毒副反应，为临床上采用瘤内注射重组人 血管内皮抑素与化疗药物联用治疗肺癌提供实验依据。 方法 1．建立C57BL／6小鼠Lewis肺癌(LLC)右上肢腋皮下移植瘤模型。 2．实验分组 接种后根据体重随机分为5组，每组10只。待移植瘤体积长至400mm3左右时， 开始给予药物干预。生理盐水组(NS组)，生理盐水每日腹腔注射0．2ml，共10天： me,／(kg’d) 每同腹腔注射，共7天，同时恩度5mg／(kg‘d)每日瘤内局部注射，共10天。 3．小鼠一般状况观察 每日观察小鼠反应、觅食、饮水、活动状况等一般情况。 4．肿瘤体积变化，绘制肿瘤生长曲线 用游标卡尺测量肿瘤最大长径(L)和与之垂直的宽径(W)，每3天测量1次， d)。 肿瘤体积V=LW2／2，绘制各组移植瘤生长曲线(0．11 5．测量肿瘤质量，计算抑瘤率。 6．病理组织技术，观察肿瘤组织结构及肺转移情况，免疫组化技术观察移植瘤组 织微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)表达。 7．酶标记免疫吸附法(ELISA法)检测小鼠血浆VEGF浓度。 结果 1．接种后5天出现肉眼可见的肿瘤，模型建立成功。 2．对小鼠一般情况的影n向 用药后NS组荷瘤鼠随着移植瘤结节的逐渐长大，进食、饮水、活动均较自矗减少： 但体重无明显减轻。Endo(it)组小鼠进食、饮水较自，J．无明显变化，活动诈常，持续 到实验结束。 3．对移植瘤体积、质量的影响 肿瘤体积(mm3)：各试验组小鼠皮下移植瘤体积随实验进行逐渐增长，NS组体 mm3、1124．98i278．25 移植瘤体积的平均值依次为2481．00-J：392．36 nllTl3、 1796．79士256．51mm3、734．97士279．77mm3、708．35士189．77mm3。其中，NS组与DDP DDP+Endo(ip)组。 DDP+Endo(it)组的瘤重减少最明显，抑瘤率高达74．24％。 4．对移植瘤微血管密度的影响 以CD34作为血管内皮细胞的标志物，血管内皮细胞的胞浆被染成棕黄色。NS 13．8-4-1．9，l 值均减低：除DDP组外其余用恩度药物干预的三组与NS组比较差异均具有显著性 明显低于DDP+Endo(ip)组。 5．对移植瘤血管内皮生长因子表达的影响 VEGF蛋白表达在肿瘤细胞的细胞质中，显为棕黄色的颗粒。NS组、DDP组、 减低：除DDP组外其余用恩度药物干预的三组与NS组比较差异均具有显著性 明显低于DDP+Endo(ip)组。 6．对小鼠血浆血管内皮生长因子的影响 DDP+Endo(ip)组(PO．05)。 结论 1．重组人血管内皮抑素瘤内局部注射能够抑制小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的生长 及转移，与全身用药相比能增加抗瘤效果且不增加不良反应。 2．重组人血管内皮抑素