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动物实验基本操作技术 实验动物的捉拿和固定方法 实验动物的给药方法 实验动物的麻醉方法 实验动物的编号方法 实验动物的去毛方法 实验动物的取血方法 实验动物的处死方法 一、实验动物的捉拿和固定方法1. 小鼠 捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上， 在其向前爬行时，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上。 2. 家兔 一手抓住兔颈部的被毛与皮肤，另一手托其臀部或腹部，使其躯干的重量大部分集中在手上。 实验动物的编号方法 染色法 耳缘剪孔法 挂牌法 烙印法 1、染色法：浅色动物 3～5％苦味酸溶液（黄色） 0.5%中性红或碱性品红溶液（红色） 2％硝酸银溶液（咖啡色，涂后光照10分钟） 煤焦油乙醇溶液（黑色） 甲紫（龙胆紫）溶液（紫色） 小鼠的编号方法 编号原则：先左后右，从上到下 2、耳缘剪孔法（穿耳孔法）：小型动物 3、挂牌法：耳标签、项圈、腿圈，中、大型动物 4、烙印法：中、大型动物 二、实验动物的给药方法 1. 注射法给药：家兔耳缘静脉注射 大、小鼠尾静脉注射 2. 摄入法给药： 家兔、大鼠、小鼠灌胃法 3. 涂布法给药 摄入法给药 自动口服给药 强制灌胃给药：大鼠 小鼠 家兔 经直肠给药 小鼠、大鼠灌胃法 器械： 灌胃器 由注射器和特殊的灌胃针构成。 小鼠灌胃针长4～5cm 直径1 mm 大鼠灌胃针长6～8cm 直径1.2mm 小鼠灌胃法 按正确方法用左手抓取和固定动物。使腹部朝上，颈部拉直。 固定后，右手持持接灌胃针的注射器吸取药液（或事先将药液吸好），将针头从口角插入口腔内，然后用灌胃针头压其头部，使口腔与食管成一直线，再将灌胃针头沿上腭壁轻轻进入，转动针头刺激动物吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道。若动物挣扎厉害，应退出后灌胃针，待动物安静后重新插入。切不可强行插入，以免损伤食道或误入气管导致动物死亡。 当感觉有落空感时表明灌胃针可能进入胃内，向外抽动注射器活塞，感觉有负压说明灌胃针未插入气管，此时可将药液灌入。 成年小鼠插管深度一般是：3cm 小鼠灌胃量： 0.1～0.25ml/10g体重 大鼠灌胃法 兔灌胃法 器械： 灌胃管（特制胃管或导尿管） 开口器（木质纺锤状） 兔灌胃法 操作方法： 1.固定：动物取直立或平卧体位，固定动物头部。 直立位需2人合作，一人取坐位，将兔的躯体和下肢夹在两腿之间，左手紧握双耳固定头部，右手抓住前肢，将兔固定于竖立体位。另一人将开口器横放于兔口中，让动物咬住开口器，即可开始插入灌胃管。 兔灌胃法 操作方法： 2.插管：将灌胃管由开口器的中央孔插入，沿上颚壁推进约15cm。 插管过程中可将灌胃管的另一端放于一杯清水中，若连续有气泡，说明插入呼吸道，应立即拔出灌胃管，重新操作；若无气泡，说明没有插入气管，即可开始注药。 兔灌胃法 操作方法： 3.给药：灌注药后可用少量清水将灌胃管里的药全部冲入胃内，以保证灌入药的剂量准确。灌胃完毕后，先退出胃管，后退出开口器。 兔灌胃法 家兔耳缘静脉注射 将动物固定于实验台上，剪去耳缘部位的被毛，用乙醇轻轻擦拭，耳缘静脉即清晰可见。用左手食指和中指夹住静脉近心端，拇指和小指夹住耳缘部分，以左手无名指和小指放在耳下作垫，待静脉充盈后，右手持注射器使针头尽量由静脉远心端刺入，顺血管方向平行、向心端刺入约1cm。 注射完毕抽出针头，用棉球压迫注射部位数分钟，以免出血。 三、实验动物的麻醉方法 （一）全身麻醉法 1、吸入法 （一）全身麻醉法 2、注射法 麻醉药： 巴比妥类药物 氯胺酮 乌拉坦 水合氯醛 （二） 局部麻醉法 1% 盐酸普鲁卡因 局部浸润麻醉 0.02～2％盐酸可卡因 表面麻醉 麻醉药物应用原则： 依据动物体重计算麻醉药物的剂量； 依据动物生命体征变化控制给药速度； 掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。 机能实验学常用手术方法 一、常用手术器械 二、常用手术插管技术 气管插管术 颈动脉插管术 颈静脉插管术 动物实验常用手术器械 粗剪 用于蛙类实验中的剪骨、肌肉和皮肤等粗硬组织以及家兔等实验动物的剪毛。 剪毛时，剪毛剪自然落下逆毛方向一次次将毛剪下即可，加力下压或一手提起被毛，均易剪破皮肤。剪下的毛应集中放入加有清水的污物盒内，避免到处飞扬。 手术剪 眼科剪 主要用于剪血管或神经等柔软组织，眼科剪也有直头与弯头之分，正确的执剪姿势与手术剪相同，即用拇指与无名