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* 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 刘福林教授设计 商丘师范学院生物学教学论实验室 反义RNA技术 汇报人： 组成员： 时间： 反义RNA技术 定义与发现 来源 功能 分类及机制 应用 展望 一、定义与发现 反义RNA技术 反义RNA（anti sense RNA): 是指与mRNA互补的RNA分子，也包括与其它RNA互补的RNA分子。 transcription 一、定义与发现 反义RNA技术 最早是在E.coli 的产肠杆菌素的Col E1质粒中发现的，许多实验证明在真核生物中也存在反义RNA。近几年来通过人工合成反义RNA的基因, 并将其导入细胞内转录成反义RNA，即能抑制某特定基因的表达，阻断该基因的功能，有助于了解该基因对细胞生长和分化的作用。 一、定义与发现 二、来源 反义RNA技术 细胞中反义RNA的来源有两种途径： 1.是反向转录的产物，在多数情况下, 反义RNA是特定靶基因互补链反向转录产物, 即产生mRNA和反义RNA的DNA是同一区段的互补链。 2.是不同基因产物，如OMPF基因是大肠杆菌的膜蛋白基因，与透性有关，其反义基因MICFZE则为另一基因。 一、定义与发现 二、来源 三、分类与机制 反义RNA技术 反义RNA，根据其作用机制可将其分为3类： Ⅰ类反义RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分编码区，直接抑制翻译，或与靶mRNA结合形成双链RNA，从而易被RNA酶Ⅲ 降解； Ⅱ类反义RNA与mRNA的非编码区结合，引起mRNA构象变化，抑制翻译；Ⅲ类反义RNA则直接抑制靶mRNA的转录。 Ⅲ类反义RNA则直接抑制靶mRNA的转录。 一、定义与发现 二、来源 三、分类与机制 反义RNA技术 一、定义与发现 二、来源 三、分类与机制 反义RNA技术 一、定义与发现 二、来源 三、分类与机制 四、功能 反义RNA技术 1.调控细菌基因的表达 反义RNA与mRNA特异性的互补结合, 即抑制了该mRNA的翻译。通过反义RNA控制mRNA的翻译是原核生物基因表达调控的一种方式 一、定义与发现 二、来源 三、分类与机制 四、功能 反义RNA技术 反义RNA参与了λ和P22噬菌体的溶菌/溶源状态的控制。 P22噬菌体编码一种抗阻遏蛋白Ant，它可以抑制许多λ样噬菌体的阻遏蛋白与DNA的结合。 这对于刚刚感染细胞的P22建立λ样原噬菌体(prophage)是有益的。 但是Ant必须在严格的控制下，否则Ant的过分表达必将阻止溶源状态的建立，而成为溶菌性的噬菌体。 Ant蛋白质表达的控制是利用反义RNA(sarRNA)能与ant mRNA的翻译起源区互补结合，从而抑制ant mRNA翻译成Ant蛋白。 2.噬菌体溶菌/溶源状态的控制 一、定义与发现 二、来源 三、分类与机制 四、功能 五、应用 六、展望 反义RNA技术 3.IS10转位作用的抑制 outRNA是一种反义RNA，可以和IS10编码的转位酶mRNA(INRNA)5端结合而抑制其翻译， 当细胞内只有一个考贝IS10时，只能生成很少量的outRNA，故转位酶仍可生成。 但当IS10的考贝数增多时，outRNA愈来愈多，其控制作用亦明显增强，所以称为多考贝抑制现象。 这种现象可以防止IS10的过量堆积引起的细胞损害。 一、定义与发现 二、来源 三、分类与机制 四、功能 五、应用 六、展望 反义RNA技术 反义RNA技术就是利用自然存在的或者人工合成的反义RNA, 通过基因重组技术反向插入到合适的表达载体形成重组DNA，然后转染受体细胞，则这一反插入的序列就会随着细胞周期产生大量反义RNA,对基因表达进行调控，从而抑制，封闭或破坏靶细胞的表达。 一、定义与发现 二、来源 三、分类与机制 四、功能