邻苯二甲酸二异丁酯的荧光免疫分析的分析研究.pdfVIP

ADissertationSubmittedto of for UniversityTechnology Guangdong the ofMasterof Science Degree Engineering The offluorescence for study immunoassay diisobutylphthalate Master Candidate：ZhengShengwu Supervisor：Prof．Zhao Suqing June2015 ofChemical and Faculty EngineeringLightIndustry of GuangdongUniversityTechnology 0006 Guangzhou，Guangdong，P．R．China，51 万方数据 摘要 摘要 邻苯二甲酸二异丁酯属于塑化剂(PES)邻苯二甲酸酯类，作为工业材料加工助剂。 于1950后大量应用于塑料制品的加工，主要用于增强材料的延展性、耐久性等加工性 能。在缺乏相对完善的毒理学研究的情况下，添加了塑化剂的塑料制品大量地应用到 食品包装行业、玩具业、医疗器械和家庭常用用品方面。近年来，大量的毒理学研究 表明：塑化剂邻苯二甲酸二异丁酯是一类环境雌性激素，这类物质进入人体后，可以 影响人体正常分泌物的合成，释放，转运，结合等过程，进而阻碍人体的正常发育。 因此，建立其免疫分析方法来实现快速检测食品中的二异丁酯污染具有十分重要的意 义。 目前邻苯二甲酸二异丁酯的检测手段主要有高效液相色谱、气相色谱，往往这些 色谱分析方法和质谱联用。这类分析方法虽然可以很准确地测量出水或食品中邻苯二 甲酸二异丁酯含量且检测限较低，但这类分析方法分析时间长、所需仪器昂贵、需要 专业的人员进行分析操作且无法实现大批样品的快速检测。因此，很有必要开发一种 简单、快速、可靠、灵敏、廉价的检测邻苯二甲酸二异丁酯的方法。免疫分析具有方 便、成本低、灵敏度高等优点可以满足简单、快速检测邻苯二甲酸二异丁酯的检测要 求。 本文通过邻苯二甲酸结构类似物4一硝基邻苯二甲酸作为中间体，经过羧基酯化和 硝基还原来获得具有邻苯二甲酸二异丁酯结构特征、同时得到可修饰氨基。再将得到 的目标分子结构衍生物采用氨基重氮化与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、鸡血清白蛋 白(OVA)偶联分别制得免疫原和包被原。免疫抗原注射免疫新西兰兔，制备多克隆抗 体，利用高灵敏度抗体建立塑化剂邻苯二甲酸二异丁酯的免疫分析方法。 利用邻苯二甲酸二异丁酯多克隆抗体建立间接竞争荧光免疫分析方法，经过分析 条件的优化，分析方法的线性范围为10．47-357．06 ng／mL。将建立的分析方法应用到植物油样品中邻苯二甲酸二异丁酯的检测，一方面该 方法的样品加标回收率为79--,102