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2012届高考生物《与名师对话》一轮复习课件:选修一1.1微生物的培养与应用.ppt
即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 实验流程 土壤取样:富含纤维素的环境 选择培养:用选择培养基培养,以增加纤维素分解菌 的数量 梯度稀释 涂布平板:将样品涂布于鉴别含刚果红CR的纤维素 分解菌的培养基(固体) 挑选产生透明圈的菌落:产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈 重要考点提示 两种常用刚果红(CR)染色法的比较 例4 (2009·安徽高考)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( ) A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 D.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养24~48小时 D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 [解析] 配制培养基时要用蒸馏水,而不能用自来水,防止杂菌污染;培养微生物时要选择适宜的温度37℃,持续时间24~48小时;土壤中微生物的量相对稳定,由于实验原因,很容易引起数量的剧烈变化,所以要选择30~300左右进行计数。 [答案] D 例5 (2010·聊城模拟)下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题: (1)实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。 材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基,盛9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。 (2)方法步骤: ①倒平板:分别将无菌培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,操作过程应在火焰旁。 ②制备土壤稀释液:取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1mL,转至9 mL的无菌水的大试管中,依次稀释到107稀释度。 ③涂布:按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布________个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布1个平板。 ④培养:放入恒温箱内,在28~30℃下培养3~4天。 ⑤细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取菌落数在________的平板进行计数。如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌落数是________。(稀释度是105) (3)预测结果:相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基平板上的菌落数应多于无氮培养基上的数目。请说明原因。 [解析] 分离自生固氮微生物,应用无氮培养基,因为氮是生物必需的元素,只有具有固氮能力的自生固氮微生物才能在无氮培养基上生长。而营养全面的牛肉膏蛋白胨培养基则允许多种微生物生长。 [答案] (2)③3 ⑤30~300 5×107 (3)无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存。 例题 关于灭菌和消毒的理解,不正确的是( ) A.灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B.消毒和灭菌实质上是相同的 C.接种环用烧灼法灭菌 D.常用的灭菌方法有加热法、紫外线法、化学药品法 错因分析 将消毒和灭菌混为一谈 对应学生用书191页 解析 酒精消毒时,体积分数为70%的酒精杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。 答案 D 条件 结果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药剂消毒法 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 【典例1】 (2009·宁夏高考) (1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行________(消毒、灭菌);操作者的双手需进行清洗和________;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________。 对应学生用书191页 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的________。 (4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。 (5)培养大
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