GC-MS衍生化法检测亚硝酸盐及在菌尿筛查中的应用.pdfVIP

-中文论著摘要- GC-MS衍生化法检测亚硝酸盐 及其在菌尿筛查中的应用 目的 亚硝酸根N02一是水溶性的无机阴离子，存在广泛，可引起中毒，具有潜在 的致癌性，同时也是一种法定限量使用的食品添加剂。N02一在生物样品中的提 取难度大，气相色谱质谱联用法不能直接检测。本研究对比了两种取代基位置不 同的二氨基萘衍生化试剂，优选出适宜血浆和尿液的GC-MS衍生化方法并尝试 在菌尿筛查中应用，反映细菌对检材中N0厂定量检测的重要影响。 方法 取血浆(或尿液)O．5“于试管中，加入10J-tgN02-(以阴离子计算)，随后加 s。将试管密封， 入内标，pH=3缓冲溶液和二氨基萘衍生化试剂，涡旋震荡30 于600C恒温加热15 ml乙酸 min。待冷却后，加入碳酸铵调至pH≈8．5，加入2 min，3500 乙酯萃取，震荡1 r／rain离心5 min，取上清液N2下浓缩，吸取1出 进样分析。将优选出的衍生化方法用于检测干化学筛查阳性的14个尿液样品和 2个阴性样品。使用岛津GC-MS QP2010，E1源，获得的质谱数据用NIST谱库 检索。 结果 min；特征离子峰为：m／z 2，3一二氨基萘与N02一的衍生产物保留时间为10．86 114、m／z141、m／z 169。1，8氨基萘衍生物的保留时间为10．04min，特征离 子同上，质谱图整体地貌相似。2，3一二氨基萘血浆标准曲线的相关性0．995(Y= 0．983(Y=0．2303X--0．2927)。2，3一二氨基萘衍生化方法血浆LOD0．05“g／na，尿 0．01 液LOD I_tg／ml，日内精密度血浆3．87～4．61％，尿液3．31～4．06％，血浆中 法血浆LOD0．1 0．05 gg／ml，尿液LOD p咖l，日内精密度血浆3．54～5．63％，尿 由此可见2，3一二氨基萘衍生化法优于l，8氨基萘衍生化法。GC-MS衍生化法 精确定量结果显示干化学阴性尿液亦能检出亚硝酸盐，并且不同等级间差异显 著。 结论 2，3一二氨基萘衍生化法检测亚硝酸盐具有可操作性强，成本低，易于普及的 特点，同时具有较好的精密度和准确性。应用于菌尿筛查时，不仅可以检出阴性 尿液中的亚硝酸盐，而且可以排除其他药物(化合物)的干扰，弥补干化学半定量 检测不足，检材检出亚硝酸盐阳性，注意排除细菌干扰。 关键词 亚硝酸盐；二氨基萘；衍生化；气相质谱；菌尿 2 -英文论著摘要- Determinationof NitriteasDerivativeGas by Chromatograph)州assSpectrometry andIts inBacteriuria Application Screening IntroductiOil wellknownforitsacute and Nit