水稻籽粒叶酸含量QTL分析及其生物强化.pdf

摘要 叶酸(维生素B9族)含量是稻米重要营养品质性状之一。本文从控制叶酸含量的数量性状位 点分析和外源基因表达开展稻米叶酸强化研究。针对水稻种质资源进行高叶酸种质筛选，并考察 Kasalath B嘲羊体进行了稻米叶酸含量QTL分析：利用拟南芥来源的7个叶酸合成途径相关基因进 行水稻叶酸生物合成代谢改造，同时对水稻内源叶酸生物合成途径基因的表达与调控进行分析， 主要研究结果如下： 1． 利用优化的三酶法和微生物法对78份水稻种质资源进行叶酸含量测定。不同品种的糙 米和精米叶酸含量变化范围分别为13．3-111．4 gg／lOOg和10．3-77．7 I_tg／1009。朝阳早18，特青， 大白谷13及青丰矮为高叶酸含量品种，其糙米叶酸含量均大于100 Hg／1009。储藏和蒸煮过程使 稻米叶酸含量分别损失了23％和48．3％。地方品种老鼠牙在蒸煮后叶酸含量最高(26．3 I上g／1009)， 如果以每日人均食用400 g的米饭进行计算，它可以为人们提供每日推荐食用量的25％叶酸(国 际推荐成人服用叶酸用量为400 1．tg／lOOg)。因此，今后可望通过进一步筛选高叶酸种质用于水稻 营养品质常规育种。 2． qFC-3c，其贡献率为24．8％，该群体中不同位点间存在上位性互作。 3． 在T2代转基因阳性植株中，系统分析了拟南芥来源的7个叶酸合成途径相关基因对水 向效果，过表达其它基因不利于种子叶酸含量的积累或起负向作用。 4． 水稻幼根、幼茎、幼叶，成熟根、茎、叶、25DPA的胚与胚乳均具有从头合成叶酸的能 力。这些组织中的内源叶酸含量从高至低依次为幼叶成熟叶片胚幼根幼茎成熟根成熟茎 25天胚乳。水稻种子发育10—30DPA过程中总叶酸含量依次降低。而种子叶酸合成途径基因的 OsDHNA m在种子发育10-30DPA过程中表达逐渐升高而后下降。其它种子优势表达基因 Ⅳ和OsFPGS 和OsHPPK，种子优势表达基因OsDHNA I 基因可能在种子叶酸从头合成过程中具有重要作用。 5． 水稻叶酸合成途径内源基因受叶酸变化水平的调控。转化AtGCHI基因(拟南芥来源的 GTP环化脱羧酶基因)的水稻转基因株系中，种子叶酸含量比野生型提高了3．7-6．1倍，其内源 基因OsDHNA 降低32．3％，而其内源基因OsGCHI，OsADCS，OsADCL II 均有显著提高。因此，水稻叶酸合成途径的调控可能存在反馈调节机制，受叶酸含量影响而产生 表达量变化的基因可能是潜在的调节点。 关键词：稻米；叶酸；QTL：生物合成；生物强化 Ⅱ Abstract isoneofthe ricenutrition fortificationof Folate(VitaminB9)content important qualities．Folate fleebasedon andmetabolic werecarriedoutinthisresearch．Ricecultivars QTLanalysis engineering andthe onricefolatentcontent time with folatecontentwereidentifiedimpact causingbystorage high and was recombin