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实验四 蛙类离体心脏灌流 【目的】 1.学习斯氏离体蛙心灌流法 2.观察K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离体心脏活动的影响。 【原理】 心肌具有自动节律性、传导性和兴奋性三大 特征。 离体和脱离神经支配的动物心脏,保持在适当的环境中,在一定的时间内,仍然能够有节律性地产生兴奋和收缩。 利用心肌细胞的这一特性,可用来制作离体心脏模型,通过灌流液中营养物质、电解质等的变化,来观察心肌能量代谢、相应药物、毒素和电解质水平对心肌活动的影响。 【仪器与设备】 蟾蜍， 蛙用手术器械，蛙心套管，蛙心夹，张力换能器， RM6240，任氏液，2%CaCl2，2%KCl，0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱。 三、实验内容与操作步骤 （一）离体蛙心灌流制作 1.破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，剪除心包膜和肝系膜（不要损伤血管） 2.第1次结扎：双结扎右主动脉 3.第2次结扎：结扎左右肺静脉、前腔静脉（远离静脉窦） 4.第3次结扎：在左右肝静脉和后腔静脉下穿线→在右肝静脉（或左肝静脉、或后腔静脉）上用眼科剪剪一斜口→用加有任氏液的蛙心套管静脉插管插入剪口→结扎固定（远离静脉窦） 5. 第4次结扎：在左主动脉下穿线→在动脉上剪一斜口→插入动脉蛙心套管动脉插管（不要插入动脉球内） →结扎固定 6. 在所有结扎处外缘远离心脏端剪除周围血管，将与蛙心套管静脉插管和动脉插管的离体蛙心