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- 2016-11-05 发布于安徽
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* DNA的粗提取与鉴定 问题1:构成生物体的主要遗传物质是什么? 问题2:如何证明它是遗传物质? 问题3:怎样才能将细胞内的这些物质分离出来? 基础知识 1、提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子 2、提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分 一、提取DNA的原理 1、DNA的溶解性 ①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 ①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下,DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的? ②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出? ②、DNA在酒精溶液中的溶解性 DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离 一、提取DNA的原理 2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ①蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响 ②大多数蛋白质不能忍受60-80度的高温,而DNA在80度以上才会变性 ③洗涤剂可以瓦解细胞的细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响 一、提取DNA的原理 3、DNA的鉴定: DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂 二、实验设计 (一)实验
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