实验二细胞器的观察与线粒体的超活染色备课笔记.docVIP

蚌埠医学院教师备课笔记 授课对象 授课时间 年 月 日 教 学 内 容 备 注 新课导入 设问：如果细胞是个家庭，那么这个家庭里有哪些成员，他们的分布位置和作用是什么，用什么方法可以观察他们呢？ 讲授新课 实验二 细胞器的观察与线粒体的超活染色 【实验目的与要求】： 1、掌握超活染色法 2、掌握光镜下线粒体、高尔基复合体的形态和分布 3、了解细胞超微结构特点 【实验器材与试剂】： 器材：光学显微镜、恒温水浴锅实验原理活体染色 (janus green b)进行染色时，细胞色素氧化酶能与詹纳斯绿发生氧化反应，线粒体呈现为蓝绿色，而周围的细胞质则被还原成无色的区域。若用中性红-詹纳斯绿混合染色，可使线粒体显示更为清楚。 【实验内容】 蟾蜍肾脏切片线粒体的观察 转换高倍镜或油镜观察，可见细胞核呈圆形，浅蓝色，内有一深染的核仁，核周围的细胞质中有许多蓝黑色颗粒或线状的结构，即为线粒体。 二、兔神经节切片高尔基体的观察1~2个发亮的呈淡黄色的核仁。细胞质中散在许多棕黑色颗粒状或短线状的结构，就是高尔基复合体。高尔基复合体在细胞内的位置一般集中于细胞核外的某一区域，但在镜下所见的神经节细胞中高尔基复合体却多半围绕在整个细胞的周围。在视野中也可以看到没有经过核的切面，该细胞内高尔基复合体就好象散在整个细胞中。 三、线粒体超活染色与观察 1、取清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上，滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液。 2、实验者用牙签宽头在自己口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞，将刮下的粘液状物放大载玻片的染液滴中，染色10－l5min(注意不可使染液干燥，必要时可再加滴染液)。 3、盖上盖玻片，用吸水纸吸去四周溢出的染液，置显微镜下观察。 4、在低倍镜下，选择平展的口腔上皮细胞，换高倍镜或油镜进行观察。可见扁平状上皮细胞的核周围胞质中，分布着一些被染或蓝绿色的颗粒状或短棒状的结构，即是线粒体。 【实验操作】 观察，并分组实验 【实验报告】 人口腔黏膜上皮细胞线粒体绘图 二、兔脊神经节细胞高尔基体绘图 注：各结构名称需标注 【讨论】 细胞内的各种细胞器电镜及光镜下的形态有什么区别 要点：线粒体：光镜下线粒体很小，呈颗粒状，杆状。若不注意区分显微结构和超微结构，可能会把肾小管切面图误认为是线粒体，因为切面图颇有点象线粒体的超微图。因此要搞清概念。 高尔基体： 电镜下所见的高尔基复合体是由小囊泡、扁平囊泡、大囊泡三部分组成，但光镜下呈颗粒状，弯曲的线状、交织的网状。 1