11第11章抗生素生产工艺解析.pptVIP

温度控制：红色链霉菌对温度敏感，全程31℃培养（若遇 发酵剧烈有转稀趋势时适当降低发酵温度），48 h粘度大 高峰期，菌体衰老较慢，发酵液转稀时间推迟。 pH控制：整个发酵过程维持pH6.6～7.2，菌丝生长良 好，不自溶，发酵单位稳定。pH过低红霉素合成完全停 止，过高（pH大于7.2）菌丝自溶，导致红霉素C的比例 增加，红霉素A含量相应降低。 中间补料 补糖：发酵过程，发酵液中还原糖控制在1.2%～1.5 %范围 内，每隔6 h加入葡萄糖，直至放罐前12～18 h停止加糖。 补有机氮：每天补加3～4次，补加量由发酵液粘度决定，若 粘度低，可增加补料量；若粘度高，可减少补料量，过高还 可补加适量水，放罐24 h前停止补料。 补前提物：一般在发酵24～39 h，当发酵液变浓，pH高于6.5 时开始补入，每隔24 h加一次，全程共加4～5次，总量为0.7 %～0.8 %，遇发酵单位增长趋势好时可适当多加。 三、红霉素的提炼工艺 （一）提炼工艺流程 1、溶媒法提炼红霉素工艺流程 2、溶媒法提炼红霉素工艺流程 3、薄膜浓缩法提炼红霉素工艺流程 红霉素是一种碱性抗生素，利用它在不同酸、碱度能溶解在不同溶剂中的特性，采用在醋酸丁酯及在水溶液中反复萃取而提纯和浓缩，最后在27～30万U/mL的丁酯溶液中冷冻结晶，即制成红霉素碱成品。 1、发酵液的预处理和过滤 发酵液中含有低浓度（0.8 %）的红霉素，绝大部分是菌丝体和未发酵的培养基及代谢产物。蛋白质的存在在溶媒萃取时将产生严重的乳化现象，给提炼带来困难，需对发酵液进行预处理和过滤。 用硫酸锌（氯化铝）沉淀蛋白质，使菌丝结团加快滤速。 (二)提炼工艺要点 2、防止和去除乳化 减少乳化，关键在于发酵液处理好，无混浊现象。同时选择合适乳 化剂。 早期去乳化剂：溴代十五烷吡啶（PPB），缺点：对成品色级有一定影响。 改进去乳化剂：十二烷基磺酸钠（DS），色泽有所改进，但带来污染。 酶制剂去乳化剂：蛋白酶和酯酶。 在萃取过程中，碱化和酸化的红霉素的收率和产品质量都有直接影响。 碱化时：pH控制在10±0.5范围较适宜。过高，将引起红霉素的碱性破坏，使乳浊更严重；过低，对萃取不利，影响收率。 酸化时： pH控制在4.9±0.3范围，过高，对红霉素稳定有利，但对萃取不利，影响收率；过低，对萃取有利，但红霉素发生酸性水解，影响质量。 3、pH和温度 4、几条工艺路线比较 溶媒反复萃取工艺路线：生产连续、周期短、收率高、产品质量好。但需要特殊设备，生物效价不高，需丙酮重结晶。 薄膜浓缩法工艺路线：操作简单，易投产，但产品质量差，需丙酮重结晶。 中间盐沉淀工艺：在萃取中加某些盐和酸使之生成红霉素碱或盐加以纯化。以红霉素乳酸盐沉淀法为国内许多生产厂家所采用。一次结晶成品可达930～960U/mg。不需用丙酮重结晶。 本节思考题 1、抗生素的定义、命名基分类？ 2、抗生素剂量表示法？ 3、青霉素生产工艺？ 4、红霉素生产工艺？ * 二、青霉素的发酵工艺 (一)发酵工艺流程 (一)发酵工艺操作要点 1、种子 丝状菌种子的制备 生产孢子的制备： 由沙土管内孢子在拉氏培养基的母颈斜面上，25℃，培养6～7 d，制成绿色孢子悬浮液，再接入装有大米 的茄子瓶培养6～7 d，大米孢子干燥保存。每批孢子必需进行严格摇瓶试验，测定效价及杂菌情况。 种子罐种子：种子培养要求产生大量健壮的菌丝体，因此，培养基应加入比较丰富的易利用的碳源和有机氮源。 青霉素采用三级发酵 一级种子发酵：发芽罐.小罐，接入小米孢子后，孢子萌发，形成菌丝。培养基成分：葡萄糖，蔗糖，乳糖，玉米浆，碳酸钙，玉米油，消沫剂等。通无菌空气，空气流量1：3（体积比）；充分搅拌300－350r/min；40～50小时；pH自然，温度27±1℃。 　二级发酵罐：繁殖罐.大量繁殖。玉米浆、葡萄糖等。1：1－1.5；250－280r/min；pH自然，25±1℃；0－14h。 三级发酵罐：生产罐。花生饼粉（高温），麸质粉、玉米浆、葡萄糖，尿素，硫酸铵，硫酸钠、硫代硫酸钠，磷酸二氢钠，苯乙酰胺及消泡剂，CaCO3等。接种量为12～15%。青霉素的发酵对溶氧要求极高，通气量偏大，通气比控制0.7～1.8；150－200r/min；要求高功率搅拌，100m3的发酵罐搅拌功率在200～300 Kw，罐压控制0.04～0.05 MPa，于25～26 ℃下培养，发酵周期在200h左右。前60h，pH5.7～6.3，后6.3～6.6；前60h为26℃，以后24℃。 球状菌生产种子的制备 原始亲米孢子： 由冻干管内孢子经混有0.5 %～1.0 %