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植物组织培养 龚玉莲 yuliangong@ 36学时 理论课24学时,实验课12学时。 《植物组织培养》,潘瑞炽主编。 《植物细胞工程》,潘瑞炽主编,广东高等教育出版社,2006 绪论 概念 细胞的全能性 植物组织培养的发展史 应用 一 概念 1 植物组织培养(plant tissue culture) 广义:是指在无菌条件下,利用人工培养基对植物及其器官、组织、细胞和原生质体等的离体培养,简称组培。 指植物的任何器官、组织或细胞,在人工预知的控制条件下,放在含有营养物质和植物生长调节物质等组成的培养基中,使其生长、分化形成完整植株的过程。 狭义的概念:指愈伤组织培养,而愈伤组织培养也是一种最常见的培养形式。 培养基(medium):用来培养植物(也可以是 其他生物)的基质。 外植体(explant):在组培中用于离体培养的对象叫外植体。 2 分类 (1)根据培养对象外植体的不同,把植物组织 培养分成5个水平:即整体的、器官的、组织的、 胚胎的、细胞的和原生质体的培养。 植株培养(plant culture) :以具备完整植株形 态的材料为外植体的无菌培养,比如幼苗、植 株。 器官培养organ culture):以植物的器官作为外 植体的培养,比如根、茎、叶、花、果实、,更 具体一些可以是根尖、根切段、茎尖、茎节、茎 切段、叶原基、叶片、叶柄、叶鞘、子叶、花瓣、 花药、胚、胚珠、子房等等。 组织培养(tissue culture):以植物各个部位的 组织作为培养对象,这是狭义的组织培养的含 义,比如:分生组织、形成层、木质部、韧皮 部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部, 或诱导的愈伤组织等等。 细胞培养(cell culture):以单个细胞为培 养对象的外植体,这种细胞可以是体细胞、 花粉细胞、卵细胞等。 原生质体培养protoplast culture):以原 生质体为外植体的培养。 (2)根据培养过程 将从植物体上分离下来的部分进行第 一次培养,称为初代培养(primary culture); 以后将培养物转移到新的培养基上继 续培养,则统称为继代培养(subculture)。 (3)根据培养基的物理状态 加入琼脂使培养基呈固体状态的培养,称固 体培养(solid culture); 不加入琼脂而培养基呈流体状态的培养,称 为液体培养(liquid culture)。 3 组织培养的优越性和特点 优越性:可以在不受植物体其他部分干扰的 情况下研究被培养部分的生长和分化的规律。 特点:取材少,培养材料经济;ren为控制 培养条件,不受自然条件影响;生长周期短,繁 殖率高;管理方便,利于自动化控制。 4 植物生物技术 又称植物生物工程,是按照人类的意愿有目 的地改良植物的一种新技术,是当前世界新技 术革命的一个重要组成部分。 组织培养是植物生物技术的主要分支之一, 在理论上是研究细胞学、遗传学、育种学、生 物化学和药物学等学科的重要手段;在生产上 在农学、园艺、林业和次生代谢产物工程等生 产领域得到广泛应用。因此,组织培养在理论 研究和生产实践中都十分重要。 二 细胞的全能性 植物组织培养的理论依据 为什么一个外植体(小到一个细胞甚至是原生 质体)能在离体条件下发育成一个完整的植株, 这是因为细胞具有全能性(totipotency)。 细胞的全能性: 任何具有完整细胞核的植物细胞,都具有母 体植株的所有遗传信息,在适宜的条件下,能 按母株的表型完整的加以表达,在形态建成上 具有再生成完整植株的潜势,在代谢上具有合 成原植株所含有的代谢产物的能力。 也就是说,只要外界条件适宜,任何一个具有 完整细胞核的细胞,在理论上,都可以发育成一 个完整的植株。其实。动物细胞也具有全能性, 只是目前的研究工作中成功的远比植物少(克隆 绵羊即是一例)。 细胞的全能性是植物组织培养的理论基础,表 明了植物组织培养在理论上的可能性。 要想让这一可能性变为现实性,必须给外植体 以适宜的外部条件。(可能性只是内因,必须通 过外因才能起作用) 要使细胞全能性表达出来,形成完整植株, 除了生长以外,还要经过分化、脱分化和再分化 等过程。 三 植物组织培养的发展史 从其发展历史可看出细胞全能性是怎样由可 能性逐步变为现实性的。 植物组织培养的历史可以追索到上世纪末和本 世纪初,它的快速发展只是近几十年的事。组织 培养的发展大致可分为以下三个阶段: 探索阶段、奠基阶段、迅速发展阶段。 1 探索阶段(20世纪初~30年代
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